lncRNA-LET过表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响及其机制的研究

来源 :广东医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hulichu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
【目的】
  研究lncRNA-LET过表达后对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响,以及探讨其中可能存在的分子调节机制。
  【方法】
  本实验设置Blank组(空白组)、GV146-NC组(阴性对照组)和GV146-LET组(实验组),使用转染试剂LipofectamineTM3000将质粒转染至HeLa细胞。通过Real-timePCR技术检测转染后lncRNA-LET的相对表达量;WesternBlot检测p-ERK1/2和p-p38蛋白表达量变化情况;MTT和平板克隆实验检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力;Hoechst33258染色实验和流式细胞术检测细胞凋亡情况。
  【结果】
  1.Real-timePCR结果显示:与GV146-NC组相比,GV146-LET组相对表达量明显升高(P<0.01)。
  2.WesternBlot结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组p-p38蛋白的表达无明显差异(P>0.05),而GV146-LET组p-ERK1/2蛋白的表达明显降低(P<0.01)。
  3.MTT和平板克隆试验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞增殖能力(P<0.01)。
  4.划痕实验和Transwell小室迁移实验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞迁移能力(P<0.01)。
  5.Transwell小室侵袭实验结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组抑制HeLa细胞侵袭能力(P<0.01)。
  6.Hoechst33258染色实验和流式细胞术结果表明:与Blank组和GV146-NC组相比,GV146-LET组对HeLa细胞凋亡无影响(P>0.05)。
  【结论】
  本研究证实了过表达lncRNA-LET可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,但对HeLa细胞的凋亡无影响。本研究结果显示,在宫颈癌中lncRNA-LET过表达抑制HeLa细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与ERK1/2通路有关,特别是与其抑制p-ERK1/2蛋白的表达有关。提示lncRNA-LET可作为宫颈癌诊断、治疗及预后评估的新靶点。
其他文献
【目的】  我们实验室的前期研究已从湛江红树林内生真菌拟茎点霉菌(Phomopsissp.)次级代谢产物中分离得到单体化合物细胞松弛素H(cytochalasinH,CyH),本文继续深入探讨CyH对肺癌细胞上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)的影响及其潜在的分子机制,为将CyH发展为抗肺癌的潜在药物提供科学依据。  【方法】  1.CyH对肺
期刊
【目的】  1.检测lnc-TMTC3在顺铂诱导的DNA损伤反应中的表达;  2.研究lnc-TMTC3对DNA损伤修复及肺癌细胞顺铂敏感性的影响;  3.揭示lnc-TMTC3影响肺癌细胞顺铂耐药的具体作用机制。  【方法】  1.利用实时荧光定量PCR检测lnc-TMTC3在多种DNA损伤模型中的表达水平。  2.在A549细胞中转染silnc-TMTC3或过表达质粒,在细胞中沉默或过表达ln
学位
【目的】  培养和鉴定人脂肪干细胞(adipose-derivedstemcells,ADSCs),建立ADSCs诱导成脂和IL-1α抑制成脂的细胞模型,通过基因芯片筛选诱导和抑制成脂条件下的差异表达基因,筛选出可能参与调节成脂分化的一簇基因,并从中选择PAMM基因,探讨其在ADSCs成脂分化过程中的作用及其调节的下游相关基因。  【方法】  1.流式细胞术鉴定ADSCs细胞的表面标志物;体外诱导
【目的】  1.探讨BTLA对梅毒患者γδT细胞效应细胞因子IFN-γ、IL-17A分泌的影响。  2.探讨梅毒抗原TPN47在体外对BTLA在梅毒患者γδT细胞中表达的影响。  【方法】  采集40例梅毒患者和30例健康对照者外周静脉血,分离PBMC和血浆。流式细胞术检测梅毒患者和健康对照者外周血γδT细胞;胞内细胞因子染色结合流式细胞术检测梅毒患者和健康对照者外周血γδT细胞胞内因子IFN-γ
学位
【目的】  本文的主要目的是探索通过生物信息学方法分析鼻咽癌复发相关细胞株CNE-2SI中IL-6上游调控因子的可行性。  【方法】  1.通过生物信息学方法对鼻咽癌干细胞分化亚群(CNE-2SI)中的差异表达基因进行分析,确定靶基因IL-6。  2.在鼻咽癌细胞CNE-2SI中验证IL-6的表达并利用生物信息学方法查询IL-6上游调控因子。  3.采用瞬时转染(lipo3000+miRNAmim
学位
【目的】  1.提取与鉴定C57小鼠来源的内皮祖细胞与内皮祖来源的外泌体。  2.探讨内皮祖细胞来源的外泌体改善SD大鼠缺血再灌注损伤的作用机制。  【方法】  从4W左右的C57小鼠的骨提取、纯化得到内皮祖细胞。采用高速离心的方法从内皮祖细胞培养的上清液中获取外泌体。60只体重为280g左右的SD大鼠分为假手术组、对照组、实验组,每一组20只。对照组与实验组分别阻断扎SD大鼠的冠状动脉前降支45
期刊
【目的】  1.鉴定circGNAQ在年轻和衰老人脐静脉血管内皮细胞(Humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)中的差异表达,分析circGNAQ作为环状RNA的基本特性。  2.探讨环状RNAcircGNAQ对血管内皮细胞衰老的影响。  3.探讨circGNAQ影响血管内皮细胞衰老的的潜在分子机制。  【方法】  1.在环状RNA拼接位点附近设计circ
学位