5’-核苷酸是核糖核酸的水解产物,在食品、医药、农业等领域具有广阔的应用前景,因此研究开发经济可行的核苷酸生产方法已经引起人们的广泛关注。本课题对酶法降解核糖核酸以及离子交换层析法分离核苷酸的工艺条件进行了研究,建立了酶解降解核糖核酸和离子交换层析法分离核苷酸的工艺技术路线。对酶解法生产核苷酸工艺条件进行了研究,考察了底物浓度、酶加量、反应温度、酶解时间、酶解反应pH等对酶解率的影响,确定了5’-磷酸二酯酶水解核糖核酸的工艺参数:核糖核酸浓度为1%,酶加量为35u/gRNA,水解温度为65℃,核糖核酸溶液初始pH为5.2,酶解反应时间为48h。在以上水解条件下,酶解反应最完全,RNA的酶解率达到了85.60%。研究了阳离子交换层析法分离5‘-核苷酸工艺条件,考察了核苷酸上样pH、上样量、洗脱剂、洗脱流速等因素对核苷酸分离的影响,确定了阳离子交换层析法对核苷酸初步分离的工艺条件:核苷酸溶液的上样pH值为2.0,上样量为1.0g/L树脂,洗脱液采用蒸馏水,洗脱液流速为0.15BV/h。在以上层析条件下经过两次层析分离,可实现四种5‘-核苷酸初步分离,其中5’-GMP,5’-AMP,5’-CMP的纯度分别达到了:96.9%,93.65%,94.78%,对应的收率分别为89.16%,83.24%,81.39%,5’-UMP的纯度仅为76.40%,需进一步分离纯化。论文研究了阴离子交换层析法分离纯化5’-UMP工艺条件,考察了5’-UMP上样pH、洗脱液等关键因素对5’-UMP纯化分离的影响,确定了阴离子交换层析法分离纯化5’-UMP的工艺条件:调节溶液pH为1.5,以1.0g/L树脂的上样量上样,采用pH4.0的盐酸溶液以为0.15BV/h的流速洗脱,分离纯化得到纯度为87.65%的5’-UMP溶液。