【摘 要】
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选择蛋白(Selectin)是一类和白细胞的运行密切相关的C类动物凝集素家族。包括E-、P-、L-选择蛋白三个成员,它们是分别存在于激活的血管内皮细胞表面、血小板和白细胞表面的黏
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选择蛋白(Selectin)是一类和白细胞的运行密切相关的C类动物凝集素家族。包括E-、P-、L-选择蛋白三个成员,它们是分别存在于激活的血管内皮细胞表面、血小板和白细胞表面的黏附分子,其表达有严格的细胞特异性。其中L-选择蛋白在大部分白细胞表面持续表达。L-Selectin为Ⅰ型跨膜糖蛋白,其N-末端的C型凝集素样结构域,又称糖识别域,以及表皮生长因子样结构域与其生物学功能密切相关。L-Selectin在循环系统发挥重要作用,如淋巴细胞的“归巢”,炎症反应中炎症细胞的聚集和渗出等。肿瘤的淋巴道转移和淋巴细胞的“归巢”现象有相似之处。此外,新近发现,甘露糖受体(mannose receptor, MR)作为新发现的L-Selectin受体可能与肿瘤的淋巴道转移相关。MR表达在淋巴管内皮上,它通过与淋巴细胞表面的L-Selectin相互识别而介导淋巴细胞黏附在淋巴管内皮上。可以设想,如果在肿瘤内的淋巴管内皮上有MR的表达,那么MR就可能介导肿瘤细胞黏附在淋巴内皮上。但是关于肿瘤细胞的黏附特性和转移能力之间的关系还缺乏大量的实验来检测。实验目的:本文选取小鼠肝癌细胞Hepa1-6为研究对象,通过L-选择蛋白与小鼠淋巴结体外黏附实验,分析L-选择蛋白与肿瘤淋巴道转移间的相关性;并检测L-选择蛋白与甘露糖受体(MR)的体外黏附,分析L-选择蛋白与其配体-甘露糖受体(MR)间相互作用对肿瘤细胞转移能力的影响等。实验方法:构建含有L-选择蛋白的重组载体pcDNA3后转染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,筛选获得稳定表达L-选择蛋白的细胞株。采用免疫组化、免疫荧光、RT-PCR、流式细胞技术等,辅之以体外黏附实验分析肝癌细胞Hepa1-6表面L-选择蛋白的表达情况、L-选择蛋白与其配体-甘露糖受体(MR)间相互作用对肿瘤细胞转移能力的影响等,从而深
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