【摘 要】
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中国林蛙(Rana temporaria chensinensis)是我国东北地区长白山麓药、食两用的珍贵蛙种。中国林蛙蛙卵具有很高的营养价值,目前国内很多学者和企业已经对中国林蛙的卵油进行
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中国林蛙(Rana temporaria chensinensis)是我国东北地区长白山麓药、食两用的珍贵蛙种。中国林蛙蛙卵具有很高的营养价值,目前国内很多学者和企业已经对中国林蛙的卵油进行了研究开发和利用,但是,从中国林蛙蛙卵中提取抗癌活性蛋白的相关研究至今国内外还未见报道。近年来国外学者研究发现,RNA 酶的类似物——蛙类卵蛋白已被证明具有明显的抗癌活性。分别来源于Rana. Pipiens(北美豹蛙)、Rana.catesbeiana(牛蛙)和Rana.japonica(日本水稻蛙)卵母细胞的蛙类卵蛋白onconase、cSBL 和jSBL 均表现出抗癌活性,后两种还表现出凝集活性。需特别指出的是,来源于Rana. Pipiens 卵母细胞的蛙类卵蛋白onconase已经作为一种癌症化学治疗药物进入了人类临床试验的第三阶段。本论文通过常规的生物化学方法,对我国特有两栖类——中国林蛙的蛙卵进行了营养成分分析后,从卵细胞中提取到具有抗癌作用的蛋白粗提物,经Sephadex G-100 柱层析实验,分离纯化得到中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白,并通过PAGE 电泳、SDS-PAGE 电泳、等电聚焦等实验对其性质进行了研究。将S180 胃肉瘤细胞接种至小鼠皮下,选取中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白不同浓度样品液,连续注射种瘤小鼠15 天后,计算抑瘤率;采用透射电镜观察细胞形态学变化;用MTT 比色法、流式细胞检测等技术观察中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白对K562 肿瘤细胞凋亡过程的诱导。经研究发现,中国林蛙蛙卵中含有多种营养成分,其中蛋白质含量相对较高;中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白具有明显的抗癌作用,同时还具有RNA 酶活性。体内实验结果表明,中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白对小鼠S180 胃肉瘤细胞有明显的抑制作用。体外实验结果表明, 中国林蛙蛙卵抗癌活性蛋白能显著诱导K562肿瘤细胞发生凋亡,显微镜下观察可见细胞膜破损、细胞变形或出现胞芽和缢痕,透明度和亮度均降低,细胞内出现有异物感的颗粒,细胞增殖作用减低,活细胞数减少;电
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