亚硝酸根和硝酸根以盐的形式广泛存在于生活中,其含量测定一直是各领域的研究热点。在法医毒物分析领域,亚硝酸盐中毒案件频发,而体内外检材中亚硝酸盐的含量可以为案件定性提供依据。在亚硝酸盐中毒案、事件中,通常使用食品相关检测标准对胃内容物、呕吐物、剩饭剩菜等体外检材中的亚硝酸根与硝酸根进行定性、定量分析,却较少对血液等体内检材进行检测。血液是毒物分析的主要检材,由于死后溶血现象普遍存在,往往只能取到全血作为检材,而取不到血浆或血清。虽有少量文献应用离子色谱法对全血检材进行检测研究,但存在阴离子干扰较大、过柱处理繁琐、检出限高、缺乏人体内源性亚硝酸根和硝酸根数据等问题。因此本文旨在建立一种灵敏度高、准确性好,可以同时定性定量全血中亚硝酸根和硝酸根的气相色谱-质谱（Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）衍生化分析方法,以解决在亚硝酸盐中毒案件中全血作为检材检测所遇到的问题。主要的研究内容如下:1.建立了全血中亚硝酸根和硝酸根的衍生化气相色谱-质谱（Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）定性、定量分析方法。对目标物提取溶剂、相转移试剂的量、衍生化方式、衍生化反应的时间温度和衍生物提取溶剂进行了优化,确定了最佳前处理条件。以同位素标记的15NO2-和15NO3-为内标,全血中的NO2-和NO3-经过乙腈提取,通过五氟苄基溴（PFB-Br）衍生后对衍生物进行GC-MS分析。结果表明,全血中NO2-在0.05～5μg/m L的范围内线性关系良好（R~2=0.995）,检出限为0.01μg/m L,准确度范围为89.6%～98.0%,批内和批间精密度范围分别为1.8%～9.2%和2.1%～6.2%,提取回收率范围为99.8%～117.9%。全血中NO3-在1～300μg/m L的范围内线性关系良好（R~2=0.997）,检出限为0.2μg/m L,准确度范围为92.8%～111.6%,批内和批间精密度范围分别为0.6%～14.4%和0.6%～3.7%,提取回收率范围为80.3%～88.4%。该方法特异性强、灵敏度高,结果准确、可靠,能够满足亚硝酸盐中毒案件检验鉴定需求。2.血液中亚硝酸盐稳定性及代谢规律研究。通过向血液中添加亚硝酸盐,探究血液中亚硝酸盐的稳定性。结果表明,NO2-进入血液后氧化为约等物质的量的NO3-,此过程消耗血液中的氧合血红蛋白,同时造成高铁血红蛋白含量的升高。为进一步探究亚硝酸盐的代谢规律,以大鼠为实验模型采取亚硝酸盐灌胃方式,探究人体亚硝酸盐中毒的代谢过程。结果表明,不同剂量灌胃,灌胃剂量越高染毒大鼠血液中的NO2-、NO3-和高铁血红蛋白含量也越高。染毒大鼠血液中的NO2-被氧化为NO3-,氧合血红蛋白中Fe2+转化为Fe3+,导致高铁血红蛋白含量异常升高。对于50 mg/kg低灌胃剂量,前8 h所采血液中NO2-、NO3-和高铁血红蛋白含量高于健康大鼠,8 h后通过代谢恢复正常。因此,对于亚硝酸盐中毒者的血液应及时送检,避免因氧化代谢而难以检出。3.实际样本分析。利用本文建立的方法测定了170份非亚硝酸盐中毒人体全血样本中内源性NO2-和NO3-的含量,为判断是否因过量外源摄入而导致亚硝酸盐中毒提供数据参考。将本研究建立的检测方法用于2例真实中毒案件,结果表明,该方法有效、可行,能够满足亚硝酸盐案例检验鉴定的分析要求。