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目的:本实验通过高脂饲料喂养大鼠建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)动物模型,并应用疏肝化滞胶囊进行药物治疗,观察疏肝化滞胶囊对NAFLD大鼠肝组织形态学、血脂、肝功能及肝组织氧化应激相关因子表达的影响,探讨疏肝化滞胶囊对NAFLD大鼠的作用效果及可能的发生机制。材料与方法:将30只SPF级SD雄性大鼠适应性喂养1周后,按随机数字表法随机分为3组,分别为:正常组、模型组、中药组,每组10只。除正常组给予普通饲料外,其余两组均以高脂饲料喂养,8周后开始进行灌胃,中药组给予中药灌胃治疗,正常组与模型组给予生理盐水灌胃作为对照。各组大鼠经过4周治疗后全部处死,留取血清和肝脏组织。用HE染色观察大鼠肝脏组织的病理形态变化;全自动生化分析仪检测各组血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、高密度脂蛋白(HDL-C)及低密度脂蛋白(LDL-C)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定肝组织氧化应激反应因子超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;荧光定量PCR检测各组肝组织中腺苷酸活化蛋白激(AMPK)、沉默信息调节因子(SIRT1)、解偶联蛋白(UCP2)基因表达;Western Blot方法检测各组肝组织AMPK、SIRT1、UCP2蛋白表达水平。结果:1.肝组织病理学结果HE染色观察:正常组大鼠肝细胞核蓝染,胞浆均匀红染,肝小叶结构清晰,肝细胞结构正常,大小均匀,细胞核正常,位于中央,无脂滴及空泡,未见明显炎症细胞浸润及脂肪变性、坏死。模型组大鼠肝小叶结构紊乱,肝细胞明显肿胀,胞浆内出现大量大小不等的脂滴,可见炎性细胞浸润,呈中、重度弥漫性大泡性脂肪变。中药组大鼠肝组织在肝小叶结构、轮廓、肝细胞形态、炎性细胞浸润等方面较模型组均有所改善。2.生化指标2.1血清TG、TC、HDL-C、LDL-C模型组血清TG、TC、LDL-C含量与正常组相比均升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而HDL-C水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中药组血清TG、TC、LDL-C水平有所降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而HDL-C水平增加(P<0.05)。2.2血清ALT、AST含量模型组大鼠血清ALT、AST含量与正常组比较均升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中药组ALT、AST含量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.肝组织SOD、MDA、GSH-Px氧化应激因子表达水平模型组大鼠肝组织SOD、GSH-Px水平与正常组比较均有降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而大鼠MDA水平明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,中药组肝组织SOD、GSH-Px水平均升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而MDA水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.肝组织AMPK、SIRT1、UCP2基因与蛋白表达量模型组AMPK、SIRT1基因和蛋白表达量与正常组比较均有所降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而UCP2基因和蛋白表达量均增加,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中药组AMPK、SIRT1基因和蛋白表达量均增加,差异具有统计学意义(P<0.05),UCP2基因和蛋白表达量均下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.疏肝化滞胶囊能够明显改善非酒精性脂肪性肝病模型大鼠肝脏组织形态学,是治疗非酒精性脂肪性肝病的有效方剂。2.疏肝化滞胶囊可以影响血清中血脂(TG、TC、HDL-C、LDL-C)含量和改善肝功能(ALT、AST),从而改善NAFLD肝脏脂质沉积,减轻肝脏脂肪变性。3.疏肝化滞胶囊可以通过调控肝组织AMPK/SIRT1/UCP2信号通路中相关基因和蛋白表达、氧化应激因子含量,从而改善脂质代谢紊乱、抑制肝脏脂肪变性、调整氧化与抗氧化失衡过程。部分阐释了疏肝化滞胶囊治疗NAFLD的作用机制。