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防风(Saposhnikovia divaricata)为伞形科防风属多年生药用草本植物,由于掠夺式采挖、草原开荒等原因,野生资源遭到严重破坏。这就造成了野生防风资源逐年减少与药材市场对防风的需求量却与日俱增的供求矛盾。因为采用植物组织培养的方法生产药用植物,具有不受地区、季节与气候限制,便于工厂化生产等优势,而且组织培养中的细胞生长速度要比植物正常生长的速度快。所以本研究按照植物组织培养的不同阶段对防风组织培养条件进行优化,以期提高药用防风的生物产量。按照防风愈伤不定芽的分化诱导、防风组培苗的生根培养以及防风生根苗的移栽等三部分进行研究,研究结果如下:一、在研究不同条件对防风不定芽分化的影响时,MS培养基添加0.2 mg/L NAA分别与2.5 mg/L 6-BA和0.4 mg/L KT,以及KT0.2+6-BA 1.0配比情况下防风愈伤的分化率都很高。适合防风愈伤继代培养的周期为25 d,而且继代培养2次防风不定芽的分化率较高。随着光照强度从5001x到20001x的增加,防风愈伤组织产生的芽数增加,丛生芽健壮,光照强度2000lx最适合防风愈伤分化出苗。二、在影响防风组培生根条件的研究中,在MS, B5和White三种培养基中,防风的生根条数相差无几,只是生根率有差别,MS培养基的生根率最高。然后在MS培养基的基础上对培养基成份进行调整,添加IBA培养基防风生根数比添加NAA的稍多,但生根率偏低,兼顾生根数和生根率时,0.4 mg/L NAA为最适合防风生根的生长调节剂浓度。培养基pH值的升高,防风不定芽生根的条数不断增加,pH到达6.0最适合防风生根。以蔗糖为碳源时防风的生根率较高,以葡萄糖为碳源的培养基防风的生根条数比较多,所以在防风组培苗生根培养最好的碳源应该是由1.5%葡萄糖和1.5%蔗糖提供的。氨态氮过多不利于防风组培苗的生长和生根,当NH4+和NO3-比值为1:4,防风不定根的生根率最高,而且不定根的条数达到最大。在供试的几个盐强度下,1/2MS和3/2MS两个低盐强度下防风生根速率和根条数最高。三、在探讨培养基生根培养条件对组培苗移栽成活影响的研究中,MS培养基中添加生长素IBA,pH为中性,MS盐浓度减半的1/2MS,以果糖为单碳源和果糖为组份复合碳源,以及氮源完全为NH4+或NO3-态氮等培养调价下,都可以获得防风组培苗的移栽最大成活率。移栽之前的炼苗可以有效提高移栽苗的成活率,2000 lx强光和15℃低温进行生根诱导的防风组培苗移栽成活率最高;另外经过1/2MS培养基和自来水中平衡培养15d的防风移栽成活率要高于未经过二次培养炼苗的成活率。培养壮苗后,决定移栽防风成活的主要因素是移栽基质和移栽环境条件。蛭石、田土和细沙三者配比为l:2:1的土壤防风组培苗移栽成活率最高,达到74.7%,其次为细沙和田土配比为l:3的土壤。而且移栽的深度和稳固度都对组培苗的成活率影响较大,移栽深度为2cm且把土压实的种植方法更利于移栽防风的成活。在4月份阴天傍晚最合适移栽防风组培苗。