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利用Nissl染色法、神经元DiI逆行标记技术、激光共聚焦扫描显微技术和计算机图像处理方法,对牛、山羊、绵羊和猪视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的形态大小、密度分布特点、树突分层及其类型进行了比较研究。研究结果如下:
1.奶牛RGCs总数为1.5×10<6>个(P1)和1.2×10<6>个(P21),平均密度为860个/mm<2>(P1)和640个/mm<>2(P21)。这些RGCs在视网膜神经乳头下方形成一个沿鼻颞侧轴方向伸展的高密度区(P1,2608个/mm<2>;P21,2174个/mm<2>),即视条纹(VS);由视条纹至周边部细胞密度呈现递减趋势,并以颞侧周边部(TP)降低的最为明显(P1,271个/mm<2>;P21,217个/mm<2>)。随着日龄增长,RGCs总数(P21/P1=0.8)和细胞密度(P21/P1=0.74)逐步减少。
2.RGCs在视网膜不同区域大小不均,视条纹的RGCs胞体面积小(351.76-549.23μm<2>);由视条纹至周边部,胞体面积逐渐增大(647.25-784.9lμm<2>)。不同动物之间RGCs胞体大小亦存在着差异,奶牛的RGCs较大(视条纹为549.23±134.27μm<2>,周边部为784.91±264.12μm<2>);而猪的RGCs较小(视条纹为351.76±78.62μm<2>,周边部为647.254-228.18μm<2>)。但是,从视条纹至周边部,猪的RGCs胞体面积增大幅度(184%倍)高于其它动物(143%-149%)。
3.根据细胞体面积和树突野大小,RGCs分为4种细胞类型:RG<,A>型(大细胞体和大树突野)、RG<,B>型(小细胞体和小树突野)、RG<,C>型(中小型细胞体和中型树突野)和RG<,D>(小细胞体和大树突野)。RG<,B>型的比例最高(40%-62%),其次为RG<,C>型(20%-29%)和RG<,A>型(12%-27%),而RG<,D>型最少,仅为4%-6%。不同动物RGCs类型所占的比例亦存在差异,猪的RG<,B>型细胞相对比例较少,仅占40%,其次为奶牛(52%),山羊RG<,B>型的比例较高(63%);而RG<,A>型细胞在猪视网膜的比例最高,为27%,其次为绵羊(16%),山羊(13%)和奶牛(12%)的最低。
4.不同类型的RGCs在视网膜不同区域出现的频率不同。RG<,B>型细胞在视条纹出现频率最高(60%-66.4%),由视条纹至周边部,RG<,B>型细胞所占的比例逐渐降低,尤其在猪仅为20.6%;而RG<,A>型细胞在视条纹的比例最低(3.8%-11.4%),周边部的比例增高,特别在猪达52.9%。
5.奶牛、绵羊、山羊和猪的视网膜内网状层(IPL)从内向外均可分为为1-5个亚层,其中1和2亚层为外层(a亚层),3-5亚层为内层(b亚层)。根据树突在IPL的分层深度,RGCs树突分层类型包括有:树突分布于IPL内、外双层的ab亚型(27%-35%)、树突分布于IPL外层的a亚型(30%-45%)和树突分布于IPL,内层的b亚型(23%-43%)。RGCs的这种分型在不同动物间略有差异,猪的a亚型。RGCs所占的比例(30%)低于其它动物(37%-42%),而b亚型RGCs所占的比例(43%)则高于其它动物(23%-29%)。
总之,RGCs的形态类型、大小和数量与密度分布在奶牛、绵羊、山羊和猪4种动物间既有共性,又存在着种间差异,这种特征性分布可能与其动物的生活习性和环境有关。