背景与目的:　　胰腺癌是消化系统疾病中常见的并且是预后最差的恶性肿瘤之一，且发病率有逐年递升的趋势，只有少于7%的胰腺癌病患生存期超过了5年。化学治疗（主要是基于吉西他滨和卡培他滨的药物方案）仍然是治疗胰腺癌的主要途径，但是其对延长病患生存期改善生存质量却无很好的疗效。因此，鉴于这一惨淡的现状，寻找新型有效的胰腺癌治疗药物是一项迫切需要的工作。黄芩素提取自唇形科植物黄芩，入药主要为其干燥根。黄芩作为我国传统药物，在《神农本草经》中被列为中品，《中华人民共和国药典》中亦有记载黄芩“清热燥湿，泻火解毒”，中医临床上单用或与其他药物配伍来用于病毒性肝炎、呼吸道感染、肿瘤等疾病的治疗，具有良好的临床功效。肿瘤微环境有很多特征，其中基本特征之一是低氧环境，在该条件下，血管内皮生长因子的表达量显著上升，而作为低氧条件下的关键转录因子HIF-1α的表达量也相应的明显提高，即HIF-1α可以通过P300/CBP调控其转录活性，从而影响VEGF的表达通过在基因水平上，继而对肿瘤的产生生长起作用。我们通过用氯化钴构建一个低氧的环境，探索黄芩素在低氧条件下是否也发挥着良好的抗肿瘤作用。与此同时，探索黄芩素是否在低氧条件下存在特征性作用及信号通路变化。在下面的实验中，我们先探索出氯化钴及黄芩素的最合适浓度，然后再一起作用于胰腺癌细胞Patu-8988型，观察胰腺癌细胞Patu-8988的上皮间质化相关因子，如波形蛋白Vimentin、神经粘附因子N-cadherin、上皮粘附分子E-cadherin如何变化，并检测HIF-1α及STAT3相关通路的变化，以了解黄芩素是否可以降低Patu-8988型细胞血管生成的表达，探索其是否通过影响HIF-1α-STAT3信号通路来实现其抗肿瘤作用。　　方法：　　⑴通过CCK8实验分别检测0/20/40/80/160μM浓度的黄芩素和0/50/100/200/300/400/500/600μM浓度的CoCl2对胰腺癌细胞的生存状态的影响并确定最合适的黄芩素和CoCl2作用浓度。　　⑵通过WB和PCR实验从蛋白和基因水平研究了解不同浓度CoCl2（0/20/40/80/160μM）对胰腺癌细胞的生物学作用，并进一步确认最佳的CoCl2作用浓度。　　⑶通过Tanswell实验，研究了解黄芩素是否对胰腺癌细胞的迁移和侵袭产生影响，实验分为5组，低氧空白组（100μM CoCl2）、胰腺癌细胞（Patu-8988）组（100μM CoCl2+20/40/80/160μM黄芩素）。　　⑷通过WB和PCR实验分别从蛋白和基因水平验证黄芩素对上皮间质化相关蛋白Vimentin、N-cadherin、E-cadherin的影响。实验分为5组，低氧空白组（100μM CoCl2）、胰腺癌细胞（Patu-8988）组（100μM CoCl2+20/40/80/160μM黄芩素）。　　⑸再通过WB实验研究黄芩素对低氧关键转录因子HIF-1α，STAT3的影响。实验分为5组，低氧空白组（100μM CoCl2）、胰腺癌细胞（Patu-8988）组（100μM CoCl2+20/40/80/160μM黄芩素）。　　结果：　　⑴用20μM浓度的黄芩素处理后，胰腺癌细胞Patu-8988生存率并没有显著降低，而20μM以上浓度的黄芩素处理后，胰腺癌细胞生存率开始明显下降。CoCl2的CCK8实验结果也证实，用100μM浓度以下的CoCl2处理后，胰腺癌细胞Patu-8988生存率并没有显著降低，而200μM以上浓度的CoCl2处理后，胰腺癌细胞Patu-8988生存率开始明显下降，这些浓度的CoCl2可以导致胰腺癌细胞Patu-8988的死亡大大增加。　　⑵在transwell实验中，我们发现加入黄芩素后，可以明显减低Patu-8988型胰腺癌细胞的侵袭和迁移能力。　　⑶WB结果显示， HIF-1α在正常组表达很少。然而，添加CoCl2之后表达显著升高。当氯化钴浓度超过100μM，与氯化钴的浓度在100μM相比时，HIF-1的增加并不明显。这些结果表明，氯化钴（100μM）能稳定诱导缺氧的环境，为后续实验提供了依据。　　⑷WB和PCR检测发现，Patu-8988型胰腺癌细胞的Vimentin、N-cadherin的表达略高于空白组，这可能与低氧环境本身就能促进这些因子表达有关。然而，黄芩素处理下，Vimentin、N-cadherin的表达明显减少。　　⑸WB检测发现，Patu-8988组HIF-1α和p-STAT3的表达加入黄芩素后，两者的表达明显下降，而STAT3的表达则略微增加。　　⑹各组间比较采用单因素方差分析，以α=0.05为检验标准，P<0.05为差异有统计学意义。　　结论：　　⑴CoCl2可以通过促进HIF-1α表达而模拟低氧条件。　　⑵黄芩素可以抑制Patu-8988型胰腺癌细胞的侵袭和迁移。即黄芩素在低氧条件下有抗癌细胞侵袭和迁移作用。　　⑶黄芩素可以通过抑制E-cadherin的丢失和N-cadherin和Vimentin的表达从而抑制胰腺癌的上皮间质转化。　　⑷黄芩素可能通过HIF-1α-STAT3通路通路抑制E-cadherin的丢失和N-cadherin和Vimentin的表达从而发挥癌作用。