论文部分内容阅读
蛋白酪氨酸激酶(Protein tyrosine kinases, PTK)是细胞信号转导过程中极为重要的物质,具有多种细胞功能。蛋白酪氨酸激酶的过度表达激活其下游信号通路,从而导致细胞转化、增殖、对抗细胞凋亡、促进细胞生存,最终导致肿瘤的形成。以酪氨酸激酶ABL为靶点的分子设计已经促使了Imatinib、Dasatinib等药物的成功上市,但临床耐药性一直存在。研究表明,PI3K/AKT/mTOR信号通路的补偿作用是导致Imatinib耐药的机制之一。因此,以ABL和P13K为双靶点的分子设计已成为当今药物研发的热点。本论文以SVM (Support Vector Machine)筛选模型,以ABL和P13K为双靶点,对PubChem和MDDR化合物分子库进行了虚拟筛选,初步筛选出来的苗头化合物再经过“Lipinski’s rule of 5"、分子对接和合成可行性等一系列评价,最终设计合成了26个包含(S)-3-氨基吡咯烷母核的、具有潜在抗肿瘤活性的化合物。采用MTT方法,以人肝癌细胞HepG-2、乳腺癌细胞MCF-7和白血病细胞K562为测试细胞株,对所合成的化合物进行了体外抗肿瘤活性测试。结果表明,该系列化合物对三组细胞株均有不同程度的抑制作用,其中对K562细胞有一定程度的选择性(5k-5m的IC50值分别是3.6μM,3.3μM和4.3μM)。激酶筛选实验结果表明,化合物5k-5m对ABL、PI3K(alpha)显示出一定的抑制作用,而且能够阻滞PI3K/AKT信号通路；细胞凋亡实验表明,该系列化合物较好的细胞活性的确是源于抑制了ABL和P13K蛋白激酶。虽然本文设计的化合物针对单一靶点的抑制活性都较低,但协同作用使得它们表现出良好的细胞活性,而且以(S)-3-氨基吡咯烷为母核的ABL和P13K双重抑制剂尚未见报到。以此为先导化合物,有望设计出结构更加新颖、活性更好、选择性更强的的ABL和P13K双重抑制,克服Imatinib临床耐药性。