介孔分子筛固定化酶的研究

来源 :北京化工大学 | 被引量 : 15次 | 上传用户:loveme2001
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以M41S族介孔分子筛为载体,以戊二醛做交联剂对木瓜蛋白酶进行了固定化。主要内容如下: 首先,在使用扩孔剂的条件下,制备了孔径在6-7nm之间的M41S族介孔分子筛MCM-41和MCM-48,并对合成的材料进行了X射线衍射分析和N2等温吸附分析。 其次,在使用交联剂戊二醛的条件下,用合成的MCM-41为载体固定了木瓜蛋白酶。在给酶量为20mg/g MCM-41、戊二醛浓度为0.75%、2h、10-20℃以及pH7.0的条件下,酶的固定化效果最佳,此时酶的固定化效率为55%。所得到的固定化酶与游离酶相比,显示出很好的热稳定性和pH稳定性。 最后,在使用交联剂戊二醛的条件下,用合成的MCM-48为载体固定了木瓜蛋白酶。在给酶量为20mg/g MCM-48、戊二醛浓度为0.75%、2h、10-20℃以及pH7.0的条件下,酶的固定化效果同样达到最佳,此时酶的固定化效率为70%。与游离酶相比,其热稳定性有了大幅度地提高,50℃条件下固定化酶的半衰期估算在2500min以上,而游离酶的半衰期只有80min左右。固定化酶的pH稳定性、对变性剂脲和有机溶剂的稳定性、储藏稳定性也都有了很大程度的改善。此外,还对固定化酶的简单动力学参数和固定化酶反应器做了初步探讨,研究结果表明:游离酶与固定化酶的米氏常数分别为7.86mg/ml和1.09mg/ml,说明固定化酶与底物的亲和力更强。固定化酶用于填充床反应器时,连续酶解12天后,其活性仍保持在初始活性的76.5%左右,说明该固定化酶具有很好的操作稳定性。因此,用本文方法制备的以MCM-48为载体的固定化木瓜蛋白酶性能良好,具有很好的应用前景。
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