芸香科(Rutaceae)黄皮属(Clausena)植物全世界约有30种,分布于东半球热带和亚热带地区。我国约有10种及2个变种,分布于长江以南各地,以海南、云南、广西及广东等省区分布的种类最多。黄皮属植物不仅果实为常见热带水果,而且作为民间药用植物,具有行气止痛,解毒散结的功效。对黄皮属植物的化学成分研究表明,其化合物类型极为丰富,包括生物碱类、香豆素类、柠檬苦素类等多种结构类型。对黄皮属植物中分离得到的化学成分的现代药理活性研究结果表明,这些化学成分大多具有广泛的生物活性,如抗肿瘤活性、抗炎活性、抗菌活性、抗病毒活性以及保肝活性等。海南黄皮为海南特有植物,截至目前为止,未见任何关于其化学成分及其药理活性的研究报道。基于以上情况,本课题组在前期研究中对海南黄皮枝叶的90%乙醇提取物的抗肿瘤活性进行了评价,结果表明具有显著的抗肿瘤活性。为了更合理地开发利用该植物资源,充分发挥其药用价值,本课题组对其化学成分进行了系统研究,并且将得到的单体化合物进行初步的抗肿瘤活性实验,寻找并发现有较好活性的单体化合物,为开发高效低毒的新药奠定理论和物质基础。将干燥的海南黄皮枝叶粉碎,采用90%的乙醇浸泡提取,减压浓缩后得浸膏,依次用石油醚和乙酸乙酯进行萃取,分别得到石油醚层、乙酸乙酯层和水层三部分浸膏。再经硅胶柱层析、凝胶柱层析和半制备型HPLC等分离技术对浸膏中的化学成分进行系统的分离和纯化,利用理化性质以及MS、NMR、UV、IR等现代波谱学技术对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。从海南黄皮枝叶的90%乙醇提取物中分离鉴定了 66个单体化合物,分别为:clausehainanine A(1)、clausehainanine B(2)、clausehainanine D(3)、clausehainanine E(4)、clausehainanine C(5)、indizoline(6)、clauemarazole E(7)、clauemarazole C(8)、claulansine B(9)、claulansine A(10)、mafaicheenamine A(11)、claulansine F(12)、7-methoxymurrayacine(13)、mafaicheenamine C(14)、clausenaline B(15)、claulansine G(16)、clausenaline D(17)、3-formylcarbazole(18)、3-formyl-6-methoxy-carbazole(19)、murrayanine(20)、3-formyl-2-hydroxy-6-methoxy carbazole(21)、methyl carbazole-3-carboxylate(22)、mukonine(23)、clausine X(24)、8-methoxypsoralen(25)、6,8-dimethoxy-4,5-dimethyl-3-methyleneisochromanl-one(26)、isogosferol(27)、imperatorin(28)、pabularinone(29)、heraclenol(30)、lansiumarin A(31)、melicotriphyllin C(32)、8-[(2E)-6-oxo-3,7-dimethyloct-2-enyloxylpsoralen(33)、clausenalansimin A(34)、(E,E)-8-(7-hydroxy-3,7-dimethylocta-2,5-dienyloxy)psoralen(35)、melicotriphyllin A(36)、claucoumarin D(37)、claucoumarin A(38)、clauhainanin A(39)、indicolactone(40)、9-[3-methyl-4-(4-methyl-5-oxo-tetrapydro-furan-2-yl)-but-2-enyloxy]-furo[3,2-g]-chromen-7-one(41)、N-phenethylbenzamide(42)、N-benzoyltyramine(43)、N-benzoyltyramine methyl ether(44)、tembamid(45)、(E-N-methyl cinnamon amide(46)、(E)-N-(4-methoxyphenethyl)-2-methylbut-2-enamide(47)、N-2-phenylethylcinnamamide(48)、N-(2-hydroxy-2-phenylethyl)cinnamide(49)、clausenalansamide B(50)、benzenepropanamide(51)、SB-204900(52)、aurantiamide(53)、aurantiamide acetate(54)、4-methoxy-2(1 H)-quinolinone(55)、4-methoxy-N-methyl-2-quinol-one(56)、isohematinic acid(57)、lansamide 4(58)、(-)-homoclausenamide(59)、lansamide 3(60)、6-O-methyl-epi-cisneoclausenamide(61)、zeta-clausenamide(62)、N-methyl-2-pyrolidinone(63)、coumaric acid(64)、isololiolide(65)、pinoresinol(66)。其中化合物1-24为咔唑类生物碱化合物,25-41为香豆素类化合物,42-63为酰胺类生物碱化合物,64为酚酸类化合物,65为萜类化合物,66为木脂素类化合物。化合物1-5,39为新化合物,化合物64-66为首次从黄皮属植物中分离得到,所有化合物均为首次从海南黄皮中分离得到。以改良MTT染色法对化合物1-8,10,15-16,33-34,36-37以及39进行抗人肿瘤细胞(HL-60,SMMC-7721,A-549,MCF-7和SW480)活性评价,结果表明香豆素类化合物的IC50值为1.36～18.96μM,咔唑类生物碱的IC50值为0.12～15.86μM。改良MTT法所评价的20个化合物均具有较好的抗肿瘤活性,化合物1,2和39对肿瘤细胞A-549、MCF-7、SW480的抑制活性甚至比阳性对照的效果更显著。这为海南黄皮的抗肿瘤活性研究提供了依据,同时,为寻找高效低毒的抗肿瘤活性药物提供了新的资源