马立克氏病毒(MDV)1型CVI988/RISPENS疫苗毒种是荷兰学者Rispens等发现的，经组织传代致弱而成。将该30代毒种用SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)传至45代，并分析其一系列免疫相关特性。　　 ⑴培养特性与血清型鉴定。CEF适应株35、40、45代毒种，30代毒种和FC126毒种分别按每胚1500PFU经卵黄囊接种5枚5日龄鸡胚，培养14～16天，记录鸡胚死亡和绒毛尿囊膜痘斑变化。分别按每4个培养瓶(100ml)毒种接种1个转瓶(1万ml)CEF细胞单层，转动培养观察至60小时，观察病变形成和发展过程，试验上述毒种采用工业化CEF细胞生产工艺的培养特性。结果表明：30代毒种和CEF适应株疫苗都具有良好的培养特性，经卵黄囊接种可在CAM上产生经典痘斑，但不致死鸡胚；CEF适应株在CEF单层上生长迅速，48-52小时天病变面积达到70％，病变形态一致，转瓶单产6-7万羽份(按每羽3500PFU计).用24孔细胞培养板培养CEF细胞，分别接种上述5种毒种和Z4毒种，分别用MDV1型(H34，H19，2BN90)，MDV2型(Y5)，MDV3型(L78)特异性单抗和型共同单抗(T81)进行IFA试验。IFA试验显示，CEF适应株毒种与MDV型共同单抗T81和1型单抗2BN90起反应，证实为MDV1型，与MDV1型强毒单抗H34、H19和MDV2型、3型单抗结果为阴性，表明不含MDV1型强毒、MDV2型以及MDV3型病毒。　　 ⑵免疫效力与免疫抑制试验。用1000PFU的CEF适应株45代毒种和30代毒种、MDV2+3型双价疫苗毒种、MDV3型FC126毒种分别免疫1日龄SPF雏鸡，7日龄分别用MDV强毒和超强毒攻击，比较免疫原性，对强毒GA(1000PFU)攻击的P1分别为87.4、91.4、82.7和62.1。对超强毒的P1分别为74.3、73.6、67.0和38.5。CEF适应株45代毒种和30代毒种两者免疫原性相当，与2+3型双价疫苗差异不显著，显著高于MDV3型FC126疫苗。用3000PFU的CEF适应株45代疫苗、MDV2+3型双价疫苗以及MDV3型FC12分别免疫1日龄SPF鸡和带有母源抗体的伊莎鸡、AA鸡、狼山鸡和乌骨鸡各20～30羽，7日龄后用超强毒攻击，比较其免疫效力，SPF鸡的P1分别为86.1、82.9、45.8。CEF适应株疫苗免疫普通鸡的PI为65.1～75.8(平均值为69.2)，与MDV2+3型双价疫苗(55.0～73.2平均值为61.7)差异不显著，显著高于3型FC126疫苗(23.3～56.5平均值为40.0)。表明，CEF适应株45代疫苗产生的免疫力对超强毒攻击的保护，与MDV2、3型双价疫苗差异不显著，显著高于MDV3型疫苗。CEF适应株45代疫苗按每羽3000PFU免疫1日龄SPF鸡，免疫后不同日龄采集全血，分离白细胞，分别接种于生长良好的细胞单层，静置培养5天后计数PFU，测定病毒载量。结果表明：4日龄鸡开始产生病毒血症(3PFU/2×106WBC)，7至21日龄达到高峰(31.5～36PFU2×106WBC)，以后逐步下降。分别用CEF适应株35代、Z4、SB1和HVT疫苗按每羽30000PFU接种10只1日龄SPF雏鸡，RB1B毒种每羽接种1000PFU，7天后每只鸡滴鼻免疫新城疫(ND)La Sota株疫苗1羽份，3周后采血测ND HI，比较抗体水平，CEF适应株35代试验组HI为7.2，对照组为7.5。结果表明，用CVI988/PispensCEF适应株疫苗免疫雏鸡，对其它疫苗的免疫无免疫抑制作用。　　 ⑶毒力稳定性与安全性。将30代毒种按30000PFU/0.2ml/只腹腔途径接种1日龄雏鸡连续回归6代制成30CR6毒。分别用30CR6毒种(107WBC)和30000PFU的CEF适应株45代、30代毒种接种20羽1日龄雏鸡，第21、70日龄分别扑杀10只，剖检观察内脏变化，并称囊重、脾重和体重，比较其毒力稳定性和安全性。试验表明：三个毒种接种1日龄雏鸡后相对囊重、相对脾重和体重与对照组无明显差异，解剖内脏无明显变化，毒种毒力无明显变化，安全性良好。