【摘 要】
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在降解羽毛蛋白生产动物蛋白饲料的过程中,主要存在两个问题:羽毛蛋白中广泛存在着二硫键,使得羽毛蛋白很难为普通的蛋白酶所降解;羽毛蛋白中一些动物必需氨基酸含量不平衡,动物日
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在降解羽毛蛋白生产动物蛋白饲料的过程中,主要存在两个问题:羽毛蛋白中广泛存在着二硫键,使得羽毛蛋白很难为普通的蛋白酶所降解;羽毛蛋白中一些动物必需氨基酸含量不平衡,动物日粮中过量添加羽毛粉会抑制动物的生产性能。本研究通过酪蛋白初筛和以羽毛为唯一的碳氮源复筛,筛选出一株具有较高角蛋白酶生产能力的菌株。对其生理生化特性进行研究后,初步鉴定其属于地衣芽孢杆菌属。对其液体发酵羽毛蛋白特性初步研究后发现,在72h时,其角蛋白酶活性和可溶性蛋白浓度达到最高,分别为166.8U/ml,2680.87μg/ml。在此基础上,对不同碳氮源对其产生角蛋白酶的影响进行了研究,结果表明,麦芽糖和半胱氨酸对地衣芽孢杆菌S6降解羽毛特性的影响最显著。通过响应面法对液体发酵培养基进行优化,最佳培养基为:(K2HPO4/KH2PO4)1.4/0.7g/L;NaCl0.3g/L;MgSO40.1g/L;麦芽糖0.03mol/L;半胱氨酸0.02mol/L;生物素28.17μg/L。本研究还对地衣芽孢杆菌S6的固体发酵培养基进行了优化,在此基础上,建立了两步法降解羽毛蛋白的工艺,相较于IFM(初始羽毛粉)和CFM (商品羽毛粉),羽毛粉SFEFM(利用建立的生物过程在一直搅拌的条件下得到)的体外消化率、经胃蛋白酶—胰蛋白酶法消化后所产生的寡肽量和可溶性蛋白量均显著提高(P <0.05);羽毛粉ISFM(利用建立的生物过程在间歇摇动的条件下得到)经胃蛋白酶—胰蛋白酶法消化后的寡肽量显著高于商品羽毛粉(P <0.05),可溶性蛋白量与之处在相当水平(P>0.05)。
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