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目的:(1)明确长期艾灸“足三里”对小鼠皮肤DNA甲基化/羟甲基化平衡和不同脑区DNA甲基化表观遗传修饰的影响;(2)明确DNA甲基化修饰在艾灸抗炎中的作用。方法:选取成年C57BL/6J小鼠,体重20±2g,随机分为非灸组、艾灸7天组、艾灸15天组、艾灸30天组。艾灸组每天给予温和灸足三里30min,非灸组于相同时间给予相同方式捆绑30min,末次干预结束处死小鼠,取艾灸侧足三里皮肤(局部皮肤)、艾灸同侧髋关节皮肤(远端皮肤)、艾灸对侧足三里皮肤(对侧皮肤),5m C ELISA和5hm C ELISA法检测皮肤DNA甲基化和羟甲基化率。采用Epigenetic PCRarray筛查艾灸30天和非灸30天小鼠的海马、下丘脑、嗅球及感觉皮层差异DNA甲基化相关基因。将基础足容积筛选后的健康成年C57BL/6J小鼠,随机分为对照组,模型组和模灸组。于足底注射完全弗氏佐剂诱导形成炎症模型。造模后第4天,模灸组给予温和灸足三里30min,对照组与模型组给予相同方式捆绑30min,共干预29天,从第1天干预结束开始,每隔4天测量一次足容积。末次干预结束处死小鼠,取血清、取艾灸侧足三里皮肤(局部皮肤)、艾灸同侧髋关节皮肤(远端皮肤)、艾灸对侧足三里皮肤(对侧皮肤),采用酶联免疫法检测血清IL-1β、皮肤5m C和5hm C含量。统计分析:数据采用SPSS21.0统计软件处理,并用Graph Pad Prism 7绘制统计图。结果:1、长期艾灸对皮肤DNA甲基化和羟甲基化率的影响非灸组局部皮肤、远端皮肤及对侧皮肤DNA甲基化率和羟甲基化率无显著性差异(P>0.05);与非灸组比较,艾灸30天组局部皮肤DNA甲基化率显著降低(P<0.01),羟甲基化率显著升高(P<0.01)。2、艾灸30天对小鼠不同脑区DNA甲基化相关基因表达的影响与非灸组比较,艾灸30天小鼠嗅球中Dnmt3a表达下调13.64倍,下丘脑中Dnmt3b表达下调2.38倍,海马中Dnmt3a表达下调2.39倍,感觉皮层中Dnmt3b表达下调2.25倍。3、艾灸对佐剂性炎症小鼠的抗炎消肿作用与对照组比较,模型组与模灸组造模后足容积显著增加(P<0.01),血清IL-1β显著升高(P<0.01);与模型组比较,模灸组在干预第19天足容积开始降低(P<0.05),在干预第24天至末次干预结束足容积显著降低(P<0.01),末次干预结束后血清IL-1β降低(P<0.05)。4、艾灸对佐剂性炎症小鼠皮肤DNA甲基化和羟甲基化率的影响与对照组比较,模型组小鼠局部皮肤、对侧皮肤和远端皮肤DNA甲基化率降低(P<0.05),DNA羟甲基化率升高(P<0.05);与模型组比较,模灸组小鼠局部皮肤、远端皮肤和对侧皮肤DNA甲基率升高(P<0.05),DNA羟甲基化率降低(P<0.05);与模灸组小鼠局部皮肤比较,模灸组小鼠远端皮肤及对侧皮肤DNA甲基化率升高(P<0.05),DNA羟甲基化率降低(P<0.05)。结论:1、长期艾灸可调节穴位局部皮肤DNA甲基化/羟甲基化修饰平衡,上调DNA羟甲基化修饰水平;2、艾灸30天对小鼠不同脑区、不同DNA甲基化相关基因的表达产生影响,主要集中在Dnmt3a和Dnmt3b,且均为下调作用;3、长期艾灸可纠正炎症引起的全身皮肤异常DNA甲基化/羟甲基化。