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转录因子同源盒基因B6(HOXB6)是同源盒(HOX)基因家族中的一员,作为重要的转录因子HOXB6调节众多下游靶基因,这些下游靶基因又参与许多生理活动,从而影响机体的表型和性状。然而,国内外有关HOXB6的研究更多的集中于其在胚胎分化发育中的作用,对其作为转录激活因子或抑制因子的作用机制研究则较少。性别决定基因盒9(SOX9)是SOX基因超家族的成员,不仅参与动物性别决定和分化,而且还参与胚胎发育基因的调控以及多种组织器官的形成。此外,SOX9在组织损伤修复再生过程中也具有重要作用。调控SOX9的信号通路有很多,如Notch、Wnt、TGFbeta和miRNA等。HOXB6对SOX9的调控尚未见报道。因此,本论文研究了HOXB6对SOX9表达的影响,并进一步解释其调控分子机制。主要研究结果如下:1.敲低HOXB6促进SOX9表达在人肝癌细胞系HepG2和人宫颈癌细胞系HeLa中,分别转染HOXB6 siRNA和对照siRNA。通过荧光定量PCR和Western Blot检测发现,敲低HOXB6显著促进SOX9表达。2.过表达HOXB6抑制SOX9表达在人肝癌细胞系HepG2和人宫颈癌细胞系HeLa中,分别转染HOXB6真核表达质粒和对照真核表达质粒。通过荧光定量PCR和Western Blot检测发现,过表达HOXB6显著抑制SOX9表达。3.HOXB6通过转录水平抑制SOX9表达在人胚肾细胞系HEK-293T中,共转染SOX9启动子质粒、pRL-TK和HOXB6真核表达质粒。通过双荧光素酶报告系统检测发现,HOXB6显著抑制SOX9启动子转录活性。4.HOXB6与SOX9基因启动子发生特异性结合为了进一步验证HOXB6与SOX9基因启动子作用的具体位点,利用HepG2细胞进行染色质免疫共沉淀(ChIP)检测发现,HOXB6在SOX9转录起始位点上游-736~-609处发生特异性地结合。