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荧光探针作为一类重要的检测物质,广泛应用于分子生物学、细胞生物学、生物化学、医学、化工等方面。目前,用于标记的荧光探针染料主要有荧光素类、罗明丹类、香豆素类、邻苯二甲醛类等,其中荧光素及其衍生物一直是生物及化学分析领域研究的热点。进入细胞内的荧光素类衍生物因其酶解所得荧光素,在水中荧光量子产率较高、摩尔消光系数高、无毒、成本低,适合于研究蛋白质结构特性及细胞检测等方面。细胞是生物体的生命活动和形态结构的基本单位。将荧光探针标记活细胞来研究特定细胞内的属性,一直是该领域的前沿研究课题。但作为活细胞标记探针必须具备：(1)探针能特异性与细胞内特定底物结合；(2)探针标记产物信号强,可区分未标记细胞；(3)探针对目标细胞无损伤；(4)背景荧光干扰小,即：荧光产物很少从细胞内渗漏出。荧光素二乙酸酯、氨基荧光素和异硫氰酸酯荧光素等曾用于标记活细胞,但荧光产物的渗漏问题未得到很好的解决。本论文以荧光素为母体,对其结构进行修饰,合成了一系列荧光化合物。合成的具有代表性的荧光化合物旨在改善其亲脂性和特异选择性,同时减少进入细胞后水解荧光素的反渗透,应用到细胞活性的检测,优化分析条件。主要内容如下几个方面：1.综述了荧光素类探针的研究进展及其在细胞学领域的应用。2.合成了荧光素和二氢荧光素,优化了二氢荧光素的合成工艺,再对其酯化。通过单一因素法对荧光素二乙酸酯(FDA)和二氢荧光素二乙酸酯(H2FDA)的稳定性进行实验,探索了其稳定存在的最佳条件：pH为6-7、温度为0℃、溶剂为丙酮、浓度为5×104g/L。3.合成了硝基荧光素、氨基荧光素、溴甲基乙酸酯中间体,并对氨基荧光素进行修饰改善其疏水性得到5种氨基荧光素衍生物：5-乙酰胺基荧光素二乙酸酯(AF-DA)、5-琥珀酰胺基荧光素(SAF)、5-丁二酰亚胺基荧光素(SF)、5-琥珀酰胺基荧光素二乙酸酯(SAF-DA)、5-琥珀酰胺基荧光素-乙酰氧基甲酯(SAF-AM),表征其结构。4.将合成的新型荧光素衍生物分别对HepG2细胞和U266细胞进行染色,探索了其对细胞染色的最佳条件：浓度为1mg/L,标记时间为5min。与FDA染色比较得出结论：AF-DA、SAF-DA、SAF-AM三种新型氨基荧光素衍生物的染色效果最好。