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胶质瘤是最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,低级别胶质瘤预后较好,高级别胶质瘤被称为胶质母细胞瘤（GBM）,是最具侵袭性的恶性原发性脑肿瘤。针对GBM患者,治疗仍以手术切除为主,辅以放疗和化疗,中位生存期仅为12-15个月。而LCN2在胶质瘤中表达上调。CircRNA是近年肿瘤研究的热点,大量研究表明,circRNA在多种肿瘤的发生发展中起到重要作用。而目前胶质瘤的发病机制仍未完全阐明,亟待深入研究,以寻求精准治疗靶点及针对性的药物开发。方法:1.通过数据库检索到与LCN2相关的circRNA,采用FISH实验,筛选出最高丰度的circRNA。对候选circRNA进行鉴定,设计合成靶向circRNA的siRNA,转染细胞系LN229和U87-MG,检测细胞凋亡和EMT过程相关指标。2.通过数据库、qPCR和双荧光素酶实验等方法,筛选与circRNA直接相互作用的miRNA,并在细胞系中干预miRNA表达,检测细胞凋亡和EMT过程相关指标。实验验证miRNA的靶标,并在肿瘤细胞中对后者进行干扰,检测上述指标。最后进行挽救实验,通过在细胞中对circRNA、miRNA和miRNA靶标分别干预,检测上述指标。3.构建circRNA低表达和过表达LN229细胞株,注射裸鼠皮下成瘤,监测瘤体生长,通过qPCR和/或western blot方法检测circRNA、miRNA及其下游靶标表达水平,并采用免疫组化、Tunel和HE染色评估瘤体组织内增殖、凋亡和病理情况。结果:1.hsacirc0088732在胶质瘤组织中丰度最高,定位于胞质,癌组织表达水平较癌旁组织显著上调;体外实验进行hsacirc0088732干扰可上调肿瘤细胞凋亡水平,并抑制EMT特征。2.a.qPCR结果显示miR-661在癌组织中表达水平显著低于癌旁组织,而miR-7不具备表达差异;RAB3D作为miR-661下游靶标,其表达与胶质瘤发展相关;b.双荧光素酶实验结果显示,hsacirc0088732可直接与miR-661相互作用;而RAB3D可作为miR-661的直接靶标;体外实验表明,干扰miR-661表达可促进肿瘤细胞存活和EMT特征;而干扰RAB3D表达对肿瘤细胞作用则相反。c.在肿瘤细胞系中进行挽救实验,结果显示hsacirc0088732/miR-661/RAB3D信号轴可对肿瘤细胞凋亡和EMT过程进行关键性的调控。3.hsacirc0088732高表达对恶性细胞成瘤具有促进作用,伴随凋亡信号减弱、增殖增加;而hsacirc0088732低表达则具有抑制成瘤的作用,并引起瘤体细胞凋亡增加和增殖减弱。在瘤体组织中,hsacirc0088732过表达伴随miR-661表达的降低,而RAB3D表达则上调。结论:1.hsacirc0088732与胶质瘤的发生具有正相关性,能促进胶质瘤发生和发展;对hsa circ0088732表达进行干预,能抑制肿瘤生长、促进细胞凋亡。2.hsacirc0088732对胶质瘤的促进作用,主要通过其发挥海绵作用吸附具有抑癌作用的miR-661,间接促进RAB3D表达,进而影响肿瘤细胞凋亡和EMT过程。3.miR-661具有抑制胶质瘤发展的功能,其作用主要通过靶向其下游靶标RAB3D,抑制后者表达,对肿瘤细胞凋亡和EMT过程进行调控。