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手性醇是一种合成手性药物的重要中间体。利用微生物转化实现羰基化合物的不对称还原制备手性醇具有反应条件温和,立体选择性强等显著优点。本文通过菌种优选得到产高选择性羰基还原酶的热带假丝酵母104菌株,可不对称还原1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙酮生成(S)-1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙醇,对映体过量值大于99.9%。在单因素实验基础上,采用部分因子实验设计考察发酵培养基中各组分对产酶的影响,结果显示,酵母粉、葡萄糖和NH4Cl浓度对产酶影响显著。继而采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并结合中心组合实验和响应面对3个显著性因素进行分析,得到最优发酵培养基组成为:葡萄糖47.14 g/L,酵母粉13.25 g/L,NH4Cl 2.71 g/L,MgSO4·7H2O 0.4 g/L,KH2PO4 1 g/L和K2HPO4 1 g/L。采用该优化培养基,供试菌株的羰基还原酶活力达到851.13 U/L,较优化前提高了65.2%。其次,考察了底物浓度,转化时间,菌体浓度和辅助底物种类及浓度对热带假丝酵母104催化1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙酮不对称还原反应的影响,从而优化了生产工艺。再次,对(S)-1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙醇的构型反转进行了研究,通过构型反转成功得到了(R)-1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙醇。最后,通过引入树脂吸附控制底物和产物浓度以避免较高浓度底物和产物对细胞的毒性,进而提高反应时-空产率。实验发现1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙酮和1-(3,5-二三氟甲基)苯基乙醇对酵母细胞活性具有明显的毒害,抑制反应的活性。引入树脂吸附可显著促进反应的进行,使用AMBERLITE XAD7HP树脂可获得较好的效果,当使用适量的树脂时底物初始浓度即使提高到150 mmol/L,还可以获得较高的产物收率,这比未引入树脂吸附时的底物浓度提高了2倍;较高浓度的乙酰乙酸乙酯(EOB)和3-羟基丁酸乙酯(EHB)对酵母细胞活性具有明显的抑制作用,引入树脂吸附可有效地促进反应的进行,AMBERLITE XAD1600树脂的效果较好。