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目的:研究中晚期宫颈鳞状细胞癌组织标本中MiR-19a在放疗敏感组和放疗抵抗组中的表达水平与宫颈癌放疗敏感性的关系,探讨MiR-19a的表达改变对宫颈癌细胞的放疗敏感性的影响,并对其调节放疗敏感性的机制进行分析,发现其与宫颈癌放射敏感性的关系及其临床指导意义,为临床预测宫颈癌放疗敏感性、改善预后,提高生存率提供新的思路和依据。材料和方法:收集2014年6月-2015年9月在新疆医科大学附属肿瘤医院住院治疗诊断明确的中晚期宫颈鳞癌病例91例,用于芯片筛选的入组患者12例,放疗抵抗组和敏感组各6例,通过芯片筛选出不同放疗敏感性的宫颈癌组织标本的差异miRNA。放疗抵抗组分为复发未控组及远处转移组各3例,结果显示miR-19a在两组的表达水平上调明显。进一步选取放疗抵抗组38例及放疗敏感组41例标本用于后续验证筛选结果的入组患者,采用实时荧光定量PCR技术检测miR-19a在两组间的表达情况,分析其与宫颈癌放疗敏感性的相关性。采用ROC曲线分析用miR-19a预测宫颈癌放疗敏感性的价值。应用Kaplan-Meier曲线分析miR-19a低表达组和高表达组宫颈癌患者的生存情况,进一步选择实验细胞株宫颈鳞癌细胞株SiHa(放疗抵抗)和Me180细胞株(放疗敏感),一方面用miR-19a-mimic与miR-19a-inhibitor转染至Siha和Me180细胞,通过克隆形成实验来检验宫颈癌细胞的放疗敏感性。另一方面,采用慢病毒载体构建miR-19a稳定转染株,通过体外体内实验对细胞放疗敏感性进行检验,通过增殖实验及凋亡实验等对miR-19a可能调节放疗敏感性机制做初步探讨,最后利用生物信息软件及网络对miR-19a可能的靶基因进行初步筛选及验证。结果:芯片筛选结果显示miRNA-19a在复发未控组及远转组当中表达均上调。因此我们推断miRNA-19a可能在导致宫颈癌细胞发生放疗抵抗、侵袭远处转移方面起到一定的作用,采用实时荧光定量PCR技术检测检测MiR-19a在放疗敏感组及抵抗组间的表达情况,结果显示两组患者比较年龄、临床分期、组织分化程度、局部淋巴结转移及肿瘤大小、治疗时间和SCC水平差异无统计学意义(P值>0.05),抵抗组miRNA-19a的表达水平为4.01±1.16,敏感组为1.39±0.85,两组比较差异有统计学意义(P=0.03),miR-19a的ROC曲线下面积0.963。至随访截止日,79例患者存活63例,死亡16例。生存时间达1年者74例、生存时间达3年者63例。随访结果,1年生存率为93.6%,3年生存率为79.7%,根据miR-19a平均表达水平把患者分为两组,低表达组和高表达组。采用K-M曲线分析两组宫颈癌患者的生存情况,结果显示和miR-19a高表达组相比miR-19a低表达组放疗后生存时间明显延长,差异有统计学意义(P=0.000)。体外试验显示,两株细胞转染miR-19a-mimic后放疗敏感性降低,转染miR-19a-inhibitor后放疗敏感性升高,裸鼠移植瘤模型结果显示和对照载体组相比转染pWPXL-19a组肿瘤组对放疗不敏感,体内外实验结果一致,增殖实验显示宫颈癌细胞转染miR-19a后的增殖无明显变化,凋亡实验结果表明miR-19a可以通过抑制射线引起的凋亡导致放疗抵抗。综上推断microRNA-19a可能通过抑制放疗诱导的细胞凋亡抑制宫颈癌细胞的放疗敏感性。通过生物学靶基因预测分析,初步结果显示PTEN、IGF2R、CUL5、Bcl-2、BAX等靶基因可能受到miR-19a的调控。进一步行Western Blot实验检测细胞凋亡相关的蛋白表达水平发现抑制MiR-19a导致了抗凋亡蛋白BAX的上调和促凋亡蛋白Bcl-2的下调。结论:宫颈鳞癌放疗抵抗患者癌组织中miR-19a高表达,细胞实验上调或下调miR-19a能够降低或升高宫颈癌细胞放疗敏感性,裸鼠模型试验结果显示已转染miR-19a肿瘤组和对照组相比对放疗不敏感,即miR-19a抑制宫颈鳞癌放疗敏感性,抑制miR-19a显著提高了SiHa细胞对放疗的敏感性,增加了凋亡,上调了BAX,下调了Bcl-2。miR-19a可能是调节宫颈癌放疗敏感性的重要因子,有望作为预测宫颈肿瘤内在放疗敏感性的标志,可为宫颈癌的治疗提供新途径。