散发性乳腺癌和乳腺增生细胞中多个微卫星位点杂合性缺失的研究

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目的:检测乳腺普通型(导管)上皮增生(usual ductal hyperplasia,UDH)、乳腺非典型(导管)上皮增生(atypical ductal hyperplasia,ADH)和浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)细胞中3p、9p、17p、17q上10个微卫星DNA(micro satellite,MS)位点的杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)频率和模式,探讨乳腺癌发生发展过程中LOH的变化规律。  方法:随机选取18例UDH患者,15例ADH患者和35例IDC患者的病理样本,选择17q,3p,9p,17q上的D3S1447、D3S1612、D3S1597、D9S171、D9S1748、D17S855、D17S579、TP53、D3S1300、D3S102910个微卫星位点,运用聚合酶链反应(PCR)—变性聚丙烯酰胺凝胶电泳—银染法对UDH、 ADH及 IDC患者的石蜡包埋组织进行微卫星杂合性缺失分析。  结果:⑴统计学结果显示:UDH组与ADH组10个MS位点LOH的频率均无统计学差异(P>0.05);⑵除D3S1029外,IDC组另9个MS位点LOH的频率均高于UDH组,两组比较具有统计学差异(P<0.05);⑶IDC组D3S1447、D3S1612、D9S171、TP53和D17S579位点LOH的频率高于ADH组,具有统计学差异(P<0.05);⑷D3S1447在IDC中发生LOH的频率最高;⑸D3S1447、D3S1029、D17S855三个位点在UDH、ADH、IDC均有一定频率的LOH发生,且有逐渐增高的趋势,D3S1447具有统计学差异;⑹TP53只有在IDC中发生LOH;D3S1612位点,淋巴结转移阳性组的LOH频率为63%,显著高于淋巴结转移阴性组(19%),二者之间的差异有统计学差异(P<0.05)。其余9个位点的LOH频率,淋巴结转移阳性样本和淋巴结转移阴性样本LOH频率均无统计学差异(P>0.05)。  结论:①D3S1447、D3S1029、D17S855的LOH发生于UHD、 ADH及 IDC,尽管组间频率不同,仍然提示3个位点的LOH组合可能是乳腺癌发生的早期分子改变模式;②TP53的LOH可能可作为分析乳腺癌浸润能力、预测复发及预后判断的独立指标,但需进一步研究证实;③D3S1612位点的LOH频率在预测乳腺癌淋巴转移风险上有一定价值。④多个微卫星DNA位点的LOH及其发生频率的观察,不失为一种从分子水平寻找乳腺癌早期阶段标志、良恶性病变鉴别的阶段标志以及淋巴转移阶段标志的好方法。
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