西葫芦为葫芦科南瓜属植物,目前保护地栽培面积仅次于黄瓜。西葫芦具有明显的杂交优势,但常规育种方法在一定程度上限制了杂种一代的选育速度。因此找到一种可以快速选育杂种一代的方法成具有重要的意义。通过花药离体培养获得单倍体植株,可以缩短育种年限,加快育种进度。本试验以‘珍玉10号’为试材,开展花药离体培养研究,探讨了西葫芦小孢子发育时期与花蕾之间的关系,初步筛选出适合花药愈伤组织诱导的培养基配方,并对诱导出的愈伤组织进行再分化研究,对西葫芦花药愈伤组织的POD活性、可溶性蛋白含量进行研究,主要结果如下:1、四分体时期花蕾纵径和横径的平均长度分别为:0.98±0.03 cm、0.47±0.04 cm,单核早期花蕾纵径和横径的平均长度分别为:1.07±0.03 cm、0.50±0.02 cm,单核中后期花蕾纵径和横径的平均长度分别为:1.17±0.03 cm、0.55±0.03 cm,双核时期纵径和横径的平均长度分别为:1.27±0.03 cm、0.61±0.03 cm,不同时期花蕾的纵径横径间存差异显著;‘珍玉10号’前9节位上的雄花同一时期的花蕾纵径横径长度最大差值为0.03 cm,不同节位间的差异不显著。2、4℃低温处理对西葫芦花药愈伤诱导率和花粉成活率均有影响,低温处理2~3 d愈伤组织的诱导率最高分别为70.42%、69.87%,此时花粉活力分别为69.86%、61.16%;低温处理第4 d后,愈伤组织诱导率和花粉成活率均显著下降,因此西葫芦花药冷处理时间不宜过长,最适宜冷处理时间为2~3 d。3、西葫芦花药愈伤组织诱导率随蔗糖浓度升高而降低,愈伤组织的形成时间随蔗糖的浓度升高而增加,较高浓度的蔗糖可以有效抑制体细胞发生愈伤组织,因此培养基中添加50 g/L的蔗糖最适宜。4、培养条件对花药愈伤组织诱导有重要影响。黑暗可以促进愈伤组织的启动,光照可以促进愈伤组织的生长;黑暗培养1周光照3周后,愈伤组织的诱导率最高为:50.71%,形成的愈伤为黄绿色。5、在西葫芦花药离体培养诱导愈伤组织阶段,在MS(蔗糖50 g/L)培养基上,NAA对诱导率的影响更加明显,当NAA浓度一定时,使用不同浓度的6-BA诱导花药,结果发现诱导率最高值和最低值的差值在12.73%~17.1%之间,而当6-BA浓度一定时,使用不同浓度的NAA诱导花药,结果发现诱导率最高值和最低值的差值在34.6%~63.45%之间;在培养基MS+NAA 2.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+5%蔗糖+0.65%琼脂,愈伤组织诱导率最高为86.41%。6、西葫芦愈伤组织在分化过程中,对其过氧化氢酶活性、可溶性蛋白含量进行测定,结果发现过氧化氢酶活性在前期(8 d)迅速升高,之后呈现波动下降的变化趋势,在培养的第16 d、24 d左右出现2次明显低谷,可溶性蛋白含量表现为先上升后下降的趋势。