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乙烯是植物五大类内源激素之一，是促进植物衰老的主要物质，因此在植物抗衰老研究，特别是在延长鲜切花采后贮藏期和货架期方面日益成为研究热点。传统的保鲜方法多采用乙烯抑制剂或乙烯拮抗剂等化学物质，不仅造成环境污染，且成本较高，采用生物技术改良鲜切花的乙烯代谢特性为这一问题的解决带来了希望。本研究在克隆香石竹（Dianthus caryophyllus L．）乙烯合成关键酶ACC氧化酶（ACO）基因片段的基础上，依据RNA干扰（RNAi）原理，构建了香石竹ACO基因的RNAi植物表达载体，并利用二次回归正交设计方法对香石竹再生体系进行了优化，并在此基础上利用农杆菌介导法将RNAi载体导入了香石竹不同品种。主要结果如下：1．香石竹ACO基因片段的克隆及其RNAi表达载体的构建根据已发表的香石竹ACO基因序列，设计一对特异引物，利用PCR技术从香石竹’Master’、‘Tasman’和‘Isabelle’3个品种基因组中均扩增得到ACO基因的1个片段。从‘Master’克隆得到的片段（831bp），与已发表的香石竹ACO基因相应序列同源性为98.9％，再以此片段为模版克隆扩增得到其相应小片段（536bp），将上述2个片段反向连接，插入到植物表达载体pCAMBIA1301中，构建成香石竹ACO基因的RNAi载体。经检验，插入片段转录后可形成发夹结构，确认载体构建成功。2．香石竹再生体系的优化以‘Tasman’叶片为外植体，利用二次回归正交设计对其再生体系建立中的关键因素6-BA和NAA的浓度及其组合进行定量优化。结果表明，增殖培养基中6-BA 1.21mg-L-1、NAA0.35 mg·L-1时，不定芽增殖数量可达3.65；6-BA 1.20～1.79 mg·L-1，NAA0.15～0.63mg·L-1时，不定芽增殖系数大于2，可靠性为95％。在置信范围内选取6-BA 1.2 mg·L-1和NAA0.3 mg·L-1的浓度组合分别进行‘Tasman’、‘Maser’和‘Isabelle’无菌苗验证实验，得到平均增殖系数为3.57、3.75和3.26。确立分化培养基为MS+6-BA 1.2 mg·L-1+NAA0.3mg·L-1。3．香石竹ACO基因RNAi表达载体的遗传转化利用电击法将ACO基因的RNAi载体导入农杆菌GV3101菌株，对香石竹的‘Master’、‘Tasman’和‘Isabelle’3个品种进行了遗传转化。结果表明，香石竹对潮霉素比较敏感，确定叶片分化选择压力为4～5 mg·L-1；转化程序为：‘Master’、‘Tasman’和’Isabelle’无菌苗在不添加任何植物生长调节剂的MS培养基上培养30d后，将叶片带基部撕下，接种于预培养培养基上培养2d后，于制备好的农杆菌菌液中(OD600为0.6～0.8)浸泡8～12min，接种于含100μmol·L-1乙酰丁香酮的共培养培养基MS+6-BA 1.2 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1上培养3d，转移到筛选培养基中培养，每3w继代一次。抗性芽长至1cm左右时切下，转至MS培养基中生根，增殖，获得27株抗性植株。