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研究背景胶质瘤是颅内最常见的原发性恶性肿瘤,近年来其发病率有逐年上升的趋势,由于肿瘤侵犯脑实质,侵袭、转移能力强,复发率高,5年生存率极低。目前,国内外治疗胶质瘤的措施仍是以手术治疗为主,辅以放、化疗及其他综合治疗。以往由于血脑屏障的存在,脑一直被看做是一个免疫豁免器官,但现在随着神经系统免疫学研究的深入,人们发现免疫细胞可以通过血脑屏障,T细胞可在脑内活化,这为脑胶质瘤的免疫治疗提供了基础。Th17、Th22细胞是新近发现的CD4+T淋巴细胞群,其中Th17细胞主要分泌IL-17因子,RORC是其分化的特异性转录调控因子；Th22细胞主要分泌IL-22因子,AHR是其分化的特异性转录调控因子。最近研究发现,Th17、Th22细胞在自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤、血液病中均有异常表达,二者参与上述疾病的发生与进展过程,但二者在脑胶质瘤中的表达及其作用的研究相对较少。研究目的通过研究脑胶质瘤患者外周血中Th17、Th22细胞比例的变化及二者的相关关系,检测外周血单个核细胞RORC mRNA及AHR mRNA的表达及血清中IL-22的浓度,旨在探究Th17、Th22细胞及其相关因子在脑胶质瘤中的表达情况,初步探讨其在脑胶质瘤发生发展中的作用。研究方法选取2014年7月至2015年8月山东大学第二医院神经外科接受治疗的34例胶质瘤患者为病例组,并按其病理类型分组,其中低级别组(WHO Ⅰ-Ⅱ)共17例,高级别组(WHO Ⅲ-Ⅳ)共17例,同期24例健康体检者为对照组,均收集其晨起空腹肘静脉全血。1.应用流式细胞术检测外周血中Th17、Th22细胞的表达比例,其中Thl7定义为CD4+IFN-γ-IL-17+, Th22定义为CD4+IFN-γ- IL-17- IL-22+,并分析二者的比例变化及其相关关系。2.采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,用Trizol法提取细胞中的总RNA,逆转录后用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测外周血单个核细胞中RORC mRNA及AHRmRNA的表达水平。3.采用酶联免疫吸附分析(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测血浆中Th22细胞相关因子IL-22的水平。研究结果1.与健康对照组相比,脑胶质瘤患者组外周血Th17细胞比例(占淋巴细胞)有升高趋势,但两组间差异无统计学意义(P>0.05),且高级别组(WHOⅢ-Ⅳ级)与低级别组(WHO Ⅰ-Ⅱ级)之间的差异无统计学意义(P>0.05)。2.与健康对照组相比,脑胶质瘤患者组外周血Th22细胞比例(占淋巴细胞)明显升高(P<0.05),且高级别组升高程度明显高于低级别组(P<0.05)。脑胶质瘤患者外周血Th17与Th22细胞的表达呈正相关关系(r=0.40,P=0.03),健康对照组二者表达无相关关系(P>0.05)。3.与健康对照组比较,脑胶质瘤患者外周血单个核细胞RORC mRNA及AHR mRNA的表达水平升高不明显(P>0.05；P>0.05)；且高级别组与低级别组相比,这两种因子的表达差异不明显(P>0.05；P>0.05)。4.脑胶质瘤患者血浆IL-22水平比健康对照组明显升高(P<0.05),但高级别组与低级别组组间差异不明显(P>0.05)。研究结论1.脑胶质瘤患者外周血中存在Th22细胞及其相关因子IL-22的异常升高,外周血Th22细胞及IL-22的变化或可作为监测脑胶质瘤发病及进展的指标。2.脑胶质瘤患者Th17与Th22细胞明显相关,二者可能共同参与脑胶质瘤的发生与发展过程,并有可能发挥协同作用。