BIT对灰霉菌的抑制作用及机理

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杀菌剂1,2-苯并异噻唑啉-3-酮(BIT)对细菌、真菌等微生物有突出的抑制作用,具有低毒、高效、水溶性好等优点,因而广泛应用于工业杀菌防腐。那么BIT开发作为新型农药时,其对农业微生物特别是灰霉菌的抑菌效果如何?作用机理又是什么呢?本文以灰霉菌作为作用靶标,采用菌丝生长速率法测定了BIT对灰霉菌抑制作用,并通过BIT处理后菌丝显微结构的观察以及菌体细胞细胞壁、细胞膜、细胞核三个层次的生理生化指标的测定,对BIT的作用机理进行了研究。实验结果如下:1.BIT对灰霉菌表现出较强的抑制作用,通过实验测得抑制中浓度(EC50)值为69.95μg·mL-1。2.经过BIT处理后的灰霉菌在透射电镜下观察,发现细胞壁结构破坏,同时测得几丁质含量的下降,说明BIT作用后导致菌体细胞壁中几丁质结构的破坏。3.BIT处理后,测得灰霉菌菌丝的电导率逐渐增大,溶液中可溶性蛋白以及可溶性糖的渗漏量增加,表明BIT改变了菌体细胞膜的通透性,导致内含物的渗漏。4.实验对β-1,3葡聚糖合成酶、几丁质酶进行活性测定,发现BIT作用后几丁质酶活性增强,而β-1,3葡聚糖合成酶活性降低,这会引起葡聚糖合成受阻、几丁质加速分解,揭示了菌体细胞壁结构破坏的原因。5.实验对过氧化氢酶进行活性测定,发现过氧化氢酶活性下降,导致解毒作用降低,影响细胞的能量代喇活动,这一点与工业杀菌机理研究具有一致性。6.不同浓度BIT分别作用于灰霉菌后进行琼脂糖凝胶电泳实验,发现不同处理组基因组DNA含量变化不大,结合透射电镜下看到细胞核完整无损,说明BIT对霉菌DNA没有损伤作用。
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