纳米纤维人工细胞外基质的制备及其应用研究

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本文主要以仿生角度为出发点,采用静电纺丝的方法制备了玉米醇溶蛋白(Zein)/鼠尾I型胶原纳米纤维膜,以模拟天然细胞外基质。首先,利用静电纺丝技术,成功制备Zein/鼠尾I型胶原复合纳米纤维膜,最佳纺丝工艺为:Zein浓度为30 wt%,胶原添加量为26.7 wt%,纺丝电压为19 kV,纺丝流量为0.8mL/h,接收距离为15cm。对纤维膜进行性能测试,FTIR谱图说明复合纤维膜由Zein和胶原两者共混组成;Zein纳米纤维膜和复合纳米纤维膜的比表面积是Zein平板膜的9-10倍,可以为细胞提供较大的生长空间;水接触角和吸水率测试结果表明,胶原可以有效地改善玉米醇溶蛋白纤维膜的疏水性,增强膜吸收液体的性能;力学性能实验说明纤维膜具有良好的柔韧性;纤维膜在水中的稳定性和酶降解实验表明,在短时间内,可以在溶液环境内稳定存在,随着时间的延长,纤维膜缓慢降解,为下一步作为药物释放载体奠定了基础。其次,对Zein/鼠尾I型胶原纳米纤维膜的生物相容性进行了研究。浸提液实验表明,复合纤维膜细胞毒性等级为1级,不存在潜在的细胞毒性,符合生物医疗器械标准;细胞黏附实验结果表明,L929细胞能够在膜表面黏附,2h内,细胞黏附率均达60%以上,且细胞黏附率随胶原含量的增加而增加;通过MTT测试和电镜照片观察,L929细胞能够在纤维膜表面黏附、伸展、增殖,均能够保持正常的生长状态,随着时间延长,细胞增殖数目逐渐增多。最后,成功制备了 Zein/Col/Drug载药纳米纤维膜,进行控释萘普生钠的研究。其他纺丝参数不变,最佳药物浓度为2wt%。FTIR和TEM结果表明,纤维表面平整光滑,药物分子均匀分布在复合纤维中;溶出液pH值实验结果在医疗器械规定范围内,符合标准要求;抑菌圈实验表明纤维膜抗菌性能明显,可以有效抑制细菌活性;将医用纱布作为对照,通过全血凝血和血小板黏附实验不仅说明载药纤维膜具有良好的凝血效果,胶原含量越高,凝血效果越好;而且能够激活血小板,且随着胶原含量的增加,血小板黏附量也增多;载药纤维膜在37℃PBS溶液中可以随着纤维膜的逐渐降解以达到药物缓慢释放的效果,从而避免了药物突释的现象。
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