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研究背景和目的:细胞免疫在机体抗肿瘤免疫应答中发挥主要作用,其效应细胞主要为活化的细胞毒T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes, CTL)和自然杀伤细胞(Nature killer cell, NK),它们可通过穿孔素(perforin, PFP)/颗粒酶B(granzymeB, GrB)介导的细胞毒途径和Fas/Fas-L介导的细胞凋亡途径发挥作用,其中PFP/GrB介导的细胞毒作用是主要途径。GrB是CTL和NK细胞中含量最丰富、发挥细胞毒作用最快且有效的颗粒酶,是主要的效应分子,能快速诱导靶细胞凋亡。近年来的研究发现,CTL和NK细胞间不会因释放GrB而相互攻击,其原因在于CTL和NK细胞自身可表达一种GrB蛋白酶特异抑制剂,即丝氨酸蛋白酶抑制剂-9(serine proteinase inhibitor 9, PI-9),防止被自身的颗粒酶或相互之间释放的颗粒酶攻击,而形成自我保护,即内源性免疫逃逸机制。我们先前的研究发现,GrB在胃良恶性上皮细胞有表达,由此我们推测胃良恶性上皮细胞是否类似于CTL和NK细胞,亦有PI-9表达而具有内源性免疫逃逸机制,形成一种自我保护能力,逃避了细胞毒T淋巴细胞的免疫杀伤作用,从而有利于肿瘤的发生、发展?本研究旨在探讨胃良恶性细胞是否亦具有细胞毒淋巴细胞类似的主动免疫逃逸分子机制,从而成为免疫豁免细胞。其意义在于揭示肿瘤细胞是否具有内在的主动免疫逃逸这一全新机制提供初步的实验依据。研究内容分为两部分:在第一部分,观察PI-9在良恶性胃上皮细胞是否有表达,其表达变化规律并探讨其临床生物学意义。在第二部分,主要观察GrB在胃癌细胞中的表达及其与PI-9表达的相互关系。旨在揭示胃癌细胞是否与细胞毒T淋巴细胞一样,也存在PI-9与GrB组成式共表达关系?方法:选取术前未进行放疗、化疗及免疫治疗,经外科行胃癌根治性或姑息性切除术后患者标本35例,收集其相应完整的临床及病理学资料。采用免疫组织化学SP法检测切缘上皮、癌旁上皮、癌细胞及相应淋巴结转移胃癌细胞中PI-9表达情况和GrB在胃癌细胞中的表达,主要探讨其在胃癌发生、发展中的作用并分析其与临床病理因素之间的关系与预后价值。结果:第一部分:1.PI-9在切缘上皮、癌旁上皮、癌细胞中均发现有PI-9表达,阳性率分别是80.00%、65.71%、42.86%,切缘上皮、癌旁上皮与癌细胞之间有差异(P<0.05),切缘与癌旁上皮细胞之间无显著差异(P>0.05);2.胃癌细胞中PI-9的表达与患者临床分期及淋巴结转移两组之间差异显著(P<0.05),与年龄、性别、组织分化及浸润深度无差异(P>0.05);3.在淋巴结转移胃癌细胞中有PI-9表达,阳性表达率为47.83%,相应的原发癌中PI-9表达率为26.07%,两者之间无差异(P>0.05)。第二部分:1.在胃癌上皮细胞中有GrB表达,阳性率是48.57%。2.35例标本中显示在胃癌上皮细胞中PI-9和GrB有阳性表达,PI9+&GrB+表达的胃癌占25.71%,PI9-&GrB-表达占34.29%,同步率60.00%;PI9+&GrB-表达的胃癌占17.14%,PI9-&GrB+占22.86%,非同步率40.00%,其中PI9-&GrB-在胃癌上皮细胞中的表达与PI9+&GrB-差异显著(P<0.05)。3.PI9+&GrB+、PI9-&GrB-、PI9+&GrB-及PI9-&GrB+在浸润深度及淋巴转移差异显著(P<0.05);进一步两两比较发现:PI9+&GrB+与PI9+&GrB-在浸润程度浅组差异显著(P<0.05);在浸润程度浅、临床分期早组PI9+&GrB十与PI9-&GrB+有显著差异(P<0.05);PI9-&GrB-与PI9+&GrB-在浸润程度深、临床分期晚及有淋巴转移组差异显著(P<0.05)。结论:1.本研究显示在人体切缘、癌旁、胃癌上皮细胞及其淋巴结转移胃癌细胞中发现有PI-9表达,初步证实我们的推测。PI-9对胃癌生物学行为的影响尚需更进一步的研究。2.GrB在胃癌中确有表达与PI-9表达有一定同步性,但未能证实两者存在必然的偶联共表达关系,PI-9和GrB在胃癌中的表达与预后是否有关尚不清楚,具体作用机制需进一步研究。