目的：表没食子儿茶素没食子酸酯（（）-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG）是从绿茶当中提取出来的药理活性最高的多酚类化合物。近年研究发现，EGCG在神经系统抗损伤方面具有很强的生物活性。本研究拟探讨其对H₂O₂（hydrogen peroxide）诱导的BV2细胞氧化应激损伤模型的保护作用及其可能的保护机制，为EGCG应用于神经变性疾病和缺血性脑卒中等神经系统损伤的治疗提供理论依据。方法：1.用CCK-8法筛选诱导细胞氧化应激损伤后出现细胞凋亡的最佳H₂O₂浓度，然后以此浓度（200μmol/L）的H₂O₂制备细胞氧化应激损伤模型，再用CCK-8法筛选出EGCG的最佳保护作用浓度（10μmol/L和20μmol/L）。2.选对数生长期的细胞随机分为4组：①空白对照组、②H₂O₂损伤组、③EGCG10μmol/L保护组及④EGCG20μmol/L保护组。应用Hoechst33258染色法观察EGCG对H₂O₂诱导的BV2细胞氧化损伤的保护作用。3.按上述分组后，分别采用免疫细胞化学法定性及Western blotting半定量观察各组细胞中Bcl-2、Bax、ERK1/2和p-ERK1/2的表达，用RT-PCR法检测Bcl-2及Bax基因的表达。结果：1.BV2细胞增值率随H₂O₂浓度的增加呈不同程度的下降趋势，200μmol／L浓度的H₂O₂诱导BV2细胞24h后，细胞活力与空白对照组相比（对照组设为100%）降为88.2±3.5%（P＜0.05），此浓度为诱导BV2细胞凋亡的最佳浓度；加入不同浓度的EGCG后，BV2细胞活力有所增加，但仅10μmol／L和20μmol／LEGCG组与未加EGCG的H₂O₂损伤组有统计学差异（P＜0.05），即10μmol／L和20μmol／L的EGCG为最佳保护浓度。2. Hoechst33258染色法显示：H₂O₂损伤组可见较多细胞的细胞核致密浓染，显示较强荧光，颜色发白，说明凋亡的细胞较多：加入EGCG保护后，凋亡细胞明显减少，与H₂O₂损伤组（57±6.4%）相比，10、20μmol／L EGCG保护组均可减少细胞核聚集浓缩，分别下降至24±2.1%（P＜0.05）,16±4.3%（P＜0.05）。3.免疫细胞化学染色发现，Bcl-2、Bax、ERK1/2和p-ERK1/2，GAPDH蛋白在各组中均表达，Western blotting半定量分析发现，Bcl-2在H₂O₂组表达明显降低，较空白对照组有统计学差异（P＜0.05），而在EGCG保护组中Bcl-2蛋白表达增加，与H₂O₂组及空白对照组相比均有统计学差异（P＜0.05）。Bax蛋白在H₂O₂组别中表达明显升高，较空白对照组有统计学差异（P＜0.05），而给予10μmol/L和20μmol/L的EGCG处理24h后，Bax蛋白表达下降，与H₂O₂组相比均有统计学差异（P＜0.05）。ERK1/2蛋白在四个分组中，表达逐渐下降，而相对应的p-ERK1/2蛋白的表达逐渐上升，10μmol/L和20μmol/L的EGCG组p-ERK1/2蛋白的表达增加较空白对照组及H₂O₂组均有统计学差异（P＜0.05），而对应的ERK1/2蛋白在10μmol/L和20μmol/L的EGCG组中的表达减少，与空白对照组及H₂O₂组相比也均有统计学差异（P＜0.05）。RT-PCR检测GAPDH内参基因在各组中均稳定表达，Bcl-2基因在H₂O₂组中表达增加，与空白对照组相比有统计学差异（P＜0.05）。在EGCG10μmol/L组，Bcl-2基因表达明显增加，在20μmol/L组Bcl-2基因表达明显减少，但与空白对照组及H₂O₂组相比，均有统计学差异（P＜0.05）。Bax基因在H₂O₂组表达明显增高，较空白对照组有统计学差异（P＜0.05）。而予以10μmol/L及20μmol/L EGCG处理24h后，Bax基因表达较H₂O₂组明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：EGCG能对抗H₂O₂所诱导的BV2细胞凋亡，其机制可能与其激活ERK1/2信号转导通路，上调pERK1/2表达及调节相关基因的转录有关，这些变化直接或间接地导致了具有抗凋亡作用的Bcl-2基因和蛋白水平表达的上调及具有促凋亡作用的Bax基因与蛋白水平表达的下调。