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目的通过研究癌基因PIK3CA在大肠癌中的突变情况,检测PI3Kp110α在大肠癌变演进过程中(正常大肠组织、轻度异型增生腺瘤、重度异型增生腺瘤、大肠癌)不同阶段组织内的表达差异,并同步检测p21、Bcl-2蛋白的表达情况,分析其相关性,初步探讨癌基因PIK3CA突变在大肠癌变过程中的作用及其致癌机制,为大肠癌的早期诊断、判断预后提供新的检测标志物,并为临床大肠癌的靶向治疗提供新的思路。材料与方法1、收集病例,阅片分组查阅2005年8月到2009年2月滨州医学院附属医院病理科存档的病理资料,收集所有大肠病变病例资料,根据WHO诊断标准,采用盲法重新阅片,按照实验要求共选取大肠病变病例172例,其中大肠癌110例,轻度异型增生腺瘤30例,重度异型增生腺瘤32例,另选取病变旁正常大肠粘膜组织12例作为对照组。2、免疫组织化学检测PI3Kp110α的表达采用免疫组化方法检测PI3Kp110α在不同病变组织的表达情况,分析PI3Kp110α在经大肠腺瘤癌变的不同阶段组织中的表达差异,探讨PI3Kp110α在大肠癌变过程中的作用;并进一步分析PI3Kp110α与大肠癌临床病理因素的相关性。3、PCR检测癌基因PIK3CA的突变情况根据PI3Kp110α表达情况,选择PI3Kp110α表达强阳性和阴性的病例,采用PCR技术检测不同组中癌基因PIK3CA的突变情况,探讨癌基因PIK3CA突变与PI3Kp110α表达的相关性。4、免疫组织化学检测PI3K/AKT通路中p21、Bcl-2蛋白的表达采用免疫组化检测PI3K/AKT通路中相关蛋白p21、Bcl-2的表达,探讨两种蛋白在大肠癌发生发展不同阶段的表达差异,并通过分析PI3Kp110α与p21、Bcl-2蛋白表达相关性,初步探讨癌基因PIK3CA突变的致癌机制。结果1、PI3Kp110α在大肠癌变不同阶段组织中的表达具有差异性PI3Kp110α在正常大肠组织、轻度异型增生腺瘤、重度异型增生腺瘤、大肠癌的阳性率分别为8.3%、10%、34%和34.5%,AOD(平均光密度)分别为0.0693±0.0062、0.0738±0.0091、0.1926±0.0023、0.1108±0.0032,两两比较显示大肠癌和重度异型增生腺瘤组织中PI3Kp110α表达显著增高,均明显高于正常大肠粘膜组织和轻度异型增生腺瘤组织(P<0.01)。2、癌基因PIK3CA突变与PI3Kp110α的表达具有相关性癌基因PIK3CA突变与PI3Kp110α的表达具有相关性,相关系数为0.79,PI3Kp110α表达阳性组癌基因PIK3CA的突变率明显高于PI3Kp110α表达阴性组(P<0.01)。3、PI3Kp110α表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关,与p21无相关性PI3K/AKT信号转导通路中Bcl-2蛋白的表达与PI3Kp110α的表达具有相关性(P<0.01),相关系数为0.53;而p21蛋白的表达与PI3Kp110α的表达无明显相关性。结论1、PI3Kp110α在重度异型增生腺瘤和大肠癌组织中的表达明显增高,其表达促进大肠重度异型增生腺瘤向大肠癌的进展过程,在大肠癌变过程中具有重要作用,可作为检测大肠癌变的早期标志物,为临床早期预测、早期诊断提供理论依据。2、PI3Kp110α的表达与大肠癌的分化、淋巴结转移以及TNM分期具有相关性,为临床判断预后提供依据。3、癌基因PIK3CA突变及异常扩增可以导致PI3Kp110α的表达增高,检测PI3Kp110α的表达情况可以成为间接反应癌基因PIK3CA突变的简便、有效的指标。4、癌基因PIK3CA突变的致癌机制是上调PI3Kp110α表达,激活PI3K/AKT通路,进而调控其下游Bcl-2等的高表达,促使细胞异常增殖。5、癌基因PIK3CA在大肠癌变过程中具有重要作用,其突变可以促进细胞的癌变,为临床靶向治疗大肠癌提供了新的思路。