樟芝液体发酵提取物抗肿瘤及免疫调节作用的研究

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bell0521
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1、采用MTT比色法,对樟芝生物学特性试验的88个提取物进行了体外药理活性的研究。筛选出对胃癌SGC7901有抑制作用的提取物52个,对肝癌HepG2有抑制作用的提取物52个,对肺癌A549具有抑制作用的提取物33个,其中有8个提取物对三种癌细胞都有抑制作用。明确了不同提取物对同种细胞的活性作用和最佳作用浓度不同;而同一个提取物对不同的靶细胞活性作用及作用浓度也不同。另外,也检测了部分提取物对人正常组织来源的肝细胞HL7702的细胞毒作用,结果显示,无任何细胞毒性,且有利于正常细胞HL7702的增殖。部分提取物与化疗药物联合作用,可以减少或抵消化疗药物5Fu的细胞毒作用,说明可以作为化疗药物的辅助药物进行研究和开发。   2、采用MTT比色法,检测了樟芝提取物对小鼠肝癌H22的体外抑制作用,结果显示四样品均有抑制作用,其中SBAC抑制作用较大,在浓度为15mg/ml时,抑制率最大为63.07%。对小鼠肉瘤S180的体外抑制作用结果显示:四样品也都具有抑制作用,其中SBAC在浓度为15mg/ml时达到最大77.99%;PAAC浓度为15mg/ml时,抑制率也达到最大为79.37%。四个樟芝样品与环磷酰胺联合抑制人肝癌HepG2,其抑制作用均减小;而在环磷酰胺损伤HepG2细胞后,除PBAC外,均促进细胞的增殖,表明樟芝提取物具有修复细胞的作用。   3、依据GB15193.3-1994急性毒性试验国家标准,设计了樟芝提取物的急性毒性试验。结果显示:在樟芝提取物剂量为22.90g/kg,小鼠的死亡率为25%,不足50%,可以推断EPAC的LD50大于22.90g/kg体重。按照国家标准半数致死剂量分级LD50>15g/kg的物质为无毒级物质。因此,实验结果显示EPAC安全可靠,且在试验期间各组动物活动正常,毛色光泽度好,无任何中毒症状。   4、采用建立肝癌H22荷瘤小鼠模型的方法,检测樟芝提取物SBAC体内抗肿瘤作用。测定了各试验组小鼠的体重、采食量、瘤重等指标,结果显示:高剂量组(500mg/kg)、中剂量组(250mg/kg)、低剂量组(125mg/kg),抑瘤率分别为11.02%、42.79%、48.83%,说明SBAC对H22荷瘤小鼠有抑瘤作用。而联合组(250mg/kg、5Fu)、阳性对照组(5Fu组),抑瘤率分别为14.93%、73.67%,且试验过程中,SBAC组比对照组体重和采食量均有显著提高,与化疗药物联合作用,减轻了化疗药物对小鼠机体的损伤,体重和采食量均有所提高。   5、通过检测脾脏、肝脏、肾脏、胸腺等脏器指数,测定自然杀伤细胞、T/B淋巴细胞和巨噬细胞的活性,研究了SBAC对H22荷瘤小鼠有明显的免疫调节作用,结果表明:SBAC组的脏器指数显著高于对照组,尤其是胸腺指数和脾脏指数,最高值分别为4.307、9.563;T淋巴细胞刺激指数在剂量为125mg/kg时最高为0.976,明显高于对照组;而SBAC在剂量为250mg/kg时,NK细胞活性也最高,达到200.79%,显著高于对照组;SBAC组小鼠的巨噬细胞在250mg/kg时,产生的NO最多为0.0136μm,说明樟芝有利于促进巨噬细胞活力。樟芝提取物提高荷瘤小鼠免疫调节能力主要是通过促进免疫器官指数、提高NK细胞杀伤活性、T细胞转化率及巨噬细胞活性来实现的。
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