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本研究选用PMSG-HCG法对昆明小鼠进行超数排卵处理,从小鼠输卵管中采取2-细胞期胚胎进行体外培养实验。研究活性氧(reactive oxygen species,ROS)--过氧化氢(H2O2)和抗氧化剂--还原型谷胱甘肽(GSH)对小鼠2-细胞期胚胎体外发育的影响,探讨哺乳动物早期胚胎的ROS防御机制,并寻找其胚胎的体外发育阻滞的原因,为提高哺乳动物早期胚胎体外发育效率,以及为实验胚胎学和发育生物学等方面的研究提供可靠的理论依据。 1、以mSOF液为基础液,分别用H2O2浓度为对照组(0%)、0.12ppm、0.13ppm、0.14ppm、0.15ppm、>0.17ppm的mSOF液进行体外培养,其囊胚发育率分别为22.2%、15.8%、16.3%、3.3%、1.1%、0%。经统计分析,对照组、0.12ppm组、0.13ppm组的囊胚发育率显著高于0.14ppm组、0.15ppm组、大于0.17ppm组(P<0.05)。 2、以H2O2浓度为0.14ppm的mSOF液为体外培养液,分别以对照组、0~12h组、12~24h组、24~36h组、36~48h组、0~48h组为试验处理组进行体外培养,其囊胚发育率分别是53.9%、13.8%、40.7%、47.5%、51.1%、14.1%。经统计分析,0~12h组和0~48h组的囊胚发育率显著低于其它几组(P<0.05),12~24h组、24~36h组、36~48h组之间均差异不显著。 3、以mSOF液为基础液,分别配制无H2O2+无GSH组、无H2O2+1mMGSH组、0.14ppm H2O2+1mMGSH组、0.14ppm H2O2+2mMGSH组、0.14ppm H2O2+5mMGSH处理组进行体外培养,其囊胚发育率分别为16.0%、31.0%、15.0%、29.0%、41.0%。经统计分析,无H2O2+1mMGSH组的囊胚发育率显著高于无H2O2+无GSH组(P<0.05);并且在添加外源性H2O2(0.14ppm)的情况下,随着GSH浓度的增加其囊胚发育率也显著增加。