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目的:探讨封闭人端粒酶RNA(human telomerase RNA,hTR)功能区的反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)后,对人结直肠癌SW480细胞的端粒酶活性、细胞凋亡率、凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)的表达及线粒体跨膜电位的影响。方法:1、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的标记5′-FAM的全硫代修饰的hTR反义寡核苷酸转染结直肠癌SW480细胞不同天数后,应用倒置荧光显微镜观察转染情况;2、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR反义寡核苷酸转染结直肠癌SW480细胞不同天数后,应用端粒酶重复扩增分析(TRAP-PCR-ELISA)检测法观察端粒酶活性的变化;3、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR反义寡核苷酸转染结直肠癌SW480细胞不同天数后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;4、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR反义寡核苷酸转染结直肠癌SW480细胞后,应用RT-PCR方法检测AIF mRNA的表达情况,评定转染是否会引起AIF的释放;5、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR反义寡核苷酸转染结直肠癌SW480细胞不同天数后,应用流式细胞仪检测线粒体跨膜电位的变化情况。结果:1、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR ASODN转染结直肠癌SW480细胞后,倒置显微镜下观察细胞,细胞内有绿色荧光均匀分布表示转染良好;2、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR ASODN转染结直肠癌SW480细胞后,TRAP-PCR-ELISA检测法观察转染24、48、72 h后,各实验组端粒酶的活性分别为:空白组0.806±0.019、0.813±0.024、0.810±0.011,正义组0.810±0.012、0.797±0.014、0.794±0.009,反义组0.657±0.014、0.411±0.020、0.396±0.018。反义组与空白组、正义组比较明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);而正义组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05);3、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR ASODN转染结直肠癌SW480细胞后,流式细胞仪测定转染24、48、72 h后,各实验组凋亡率分别为:空白组(3.07±0.11)%、(3.71±0.63)%、(4.23±0.41)%,正义组(4.28±0.41)%、(4.49±0.56)%、(5.13±0.56)%),反义组(13.11±0.32)%、(22.04±0.21)%、(16.71±0.82)%。反义组分别与空白组、正义组比较,差异有统计学意义(P <0.05);而正义组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05);4、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR ASODN转染结直肠癌SW480细胞48h后,PCR产量空白组、正义组、反义组分别为(0.1527±0.0021)、(0.158 0±0.0078)、(0.3683±0.0109)。反义组分别与空白组、正义组比较,差异有统计学意义(P<0.05);正义组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05);5、最佳转染浓度(2.5μmol/L)的hTR ASODN转染结直肠癌SW480细胞后,流式细胞仪测定转染24、48、72 h后,各实验组线粒体跨膜电位分别为:空白组51.68±0.55、51.63±0.74、50.72±0.60,正义组51.35±0.79、50.73±0.73、50.02±0.53,反义组41.24±0.87、33.63±0.67、34.68±0.67。反义组较空白组和正义组呈下降表现,差异有统计学意义(P<0.05);正义组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:封闭hTR ASODN可降低结直肠癌SW480细胞的端粒酶活性,增强AIF的表达,降低线粒体跨膜电位,从而抑制肿瘤细胞的生长与增殖,诱导细胞凋亡,从而为肿瘤的基因治疗提供依据。