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目的前期研究显示线粒体分裂融合基因表达异常可导致线粒体功能障碍,本研究通过不同浓度的过氧化氢(H2O2)建立人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)氧化损伤模型,观察线粒体分裂基因(Fis1,Dnmp1,MTP18)和融合基因(Mfn1,Mfn2)在不同浓度过氧化氢的氧化损伤下的ARPE-19细胞中的表达情况。方法培养的ARPE-19细胞分为正常对照组和不同浓度的H2O2损伤组,正常对照组不作任何处理,损伤组加入不同浓度的H2O2(75μmol/L、150μmol/L、200μmol/L)培养24h。实时无标记细胞分析仪绘制细胞生长曲线;MTT法检测对照组及损伤组细胞活性;倒置相差显微镜观察各组细胞的形态、数量变化;电子显微镜观察各组细胞线粒体形态、结构及数量变化;RT-PCR和Real-time PCR技术检测线粒体分裂基因(Fis1,Dnmp1,MTP18)和融合基因(Mfn1,Mfn2)在正常对照组和损伤组细胞内的表达情况,并做半定量统计学分析。结果实时无标记细胞分析仪绘制的细胞生长曲线随着H2O2浓度的增高呈下降趋势。MTT法检测结果显示H2O2明显降低ARPE-19细胞活性(P<0.05),且随着H2O2浓度的增加,细胞活性呈下降趋势。倒置相差显微镜观察到,随着H2O2浓度的增高损伤组的细胞皱缩加重,悬浮细胞增多;电子显微镜观察各组细胞线粒体随着H2O2浓度的增高形态发生改变,低浓度过氧化氢组线粒体变长,线粒体嵴数量减少,随着H2O2浓度的逐渐增高线粒体发生分裂,碎裂成片,正常结构完全消失;RT-PCR结果显示,与正常对照组相比在不同浓度H2O2建立的ARPE-19细胞氧化损伤组中,线粒体分裂基因Fis1表达降低(P<0.05),但不同浓度过氧化氢建立的氧化损伤组间无统计学差异,线粒体分裂基因MTP18、Dnmp1,融合基因Mfn1、Mfn2表达改变无统计学差异。Real-time PCR结果显示,线粒体分裂基因Fis1表达降低(P<0.05),融合基因Mfn2在200μM H2O2处理时表达升高(P<0.05),其余基因表达改变无统计学差异。结论线粒体分裂基因Fis1及融合基因Mfn2表达异常可能导致ARPE-19细胞的线粒体功能障碍,线粒体的动态平衡被破坏,进而参与细胞的氧化损伤反应。