反刍动物瘤胃酸中毒是当前反刍动物养殖业中的主要的营养代谢病之一,该病主要与高精料条件下瘤胃微生物区系紊乱有关,微生物区系紊乱导致瘤胃液VFA浓度和乳酸浓度大量增加,瘤胃异常代谢产物激增,pH值下降。但瘤胃中乳酸到底主要由哪些微生物产生?这些微生物与瘤胃VFA之间有何关联?瘤胃内异常代谢产物、瘤胃微生物区系与日粮组成间存在何种联系?目前相关报道并不多见。为阐明瘤胃中主要的产乳酸菌类型,探索日粮结构、产乳酸菌群与瘤胃代谢产物间的关联,寻找可有效调控瘤胃pH、VFA产量及乳酸生成的物质。本研究采用微生物分离技术,结合PCR/DGGE、Real-time PCR等分子手段,从微生物区系和疾病发生的营养生理学角度进行了相关的试验。试验分为三部分：一瘤胃源乳酸菌的分离鉴定及产酸特性的研究为深入探讨瘤胃中乳酸菌的种类及其产酸特性,本实验利用微生物划线分离技术从饲喂精粗比例为6：4的本地健康山羊瘤胃中分离到6株产乳酸菌,分别命名为L2、L3、L5、L8、L10和L12。生化和分子生物学鉴定结果显示,6株细菌主要为2类：L2、L5、L8、L12为牛链球菌属,L3和L12为魏斯菌属。生长曲线结果表明,接种2h后6株菌逐步进入对数生长期,8h后进入平台期。L-乳酸和D-乳酸测定结果显示,L3、L5、L8、L10和L12的L-乳酸产量均在14mmol/L以上；L3、L5和L12几株细菌的D-乳酸产量在14mmol/L以上,L2和L10分别为4.17mmol/L和5.07mmol/L,L8的D-乳酸产量在lmmol/L以下。结果显示,高精料日粮条件下,山羊瘤胃中主要的产乳酸菌属链球菌属及魏斯菌属,且以产混合型乳酸为主。二提高日粮精料水平对山羊瘤胃发酵、产乳酸菌群及LPS浓度的影响本试验研究了在精料比例递增情况下,山羊瘤胃发酵参数、血液和瘤胃液中脂多糖的变化,以及瘤胃液中乳酸杆菌区系与主要产乳酸菌群的变化情况。试验选用四只健康阉割山羊,采用自身对照试验设计,试验分为3期进行,即Ⅰ期为全粗料,Ⅱ期精粗比为60：40,Ⅲ期为80：20。试验结果表明,随精料比例的提高,瘤胃液中pH值显著降低；乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸TVFA浓度均显著增加(P<0.05),而乙丙比显著降低(P<0.05)。第1期试验瘤胃液中未检测到乳酸的存在,第Ⅱ和Ⅲ期试验瘤胃液中乳酸浓度分别为0.67mmol/L和0.95mmol/L。随精料比例增加,瘤胃液及血液中脂多糖的含量皆显著升高(P<0.05)。可培养乳酸菌和大肠杆菌的数量未有显著差异(P>0.10)。 DGGE图谱分析结果表明,日粮精料水平提高了乳酸菌菌群的多样性脂数,Real-time PCR定量结果表明,随精料水平提高,乳酸杆菌和总细菌数量显著变化(P<0.05),牛链球菌和大肠杆菌数量未有显著变化(P>0.05)。结果说明,日粮精料水平可显著影响瘤胃中pH、VFA及血液中LPS水平(P<0.05),而对大肠杆菌和牛链球菌的数量无显著影响。三体外法研究阿卡波糖对模拟瘤胃酸中毒的调控作用本试验通过体外批次培养技术,研究了阿卡波糖对高精料条件下瘤胃微生物发酵活力及产乳酸的影响。试验按阿卡波糖的添加量(0、0.10.2、0.4mg/mL)分设4组,每组4个重复,底物组成为0.8g粉碎玉米和0.2g粉碎羊草,体外发酵24小时。试验结果表明：添加阿卡波糖显著提高了发酵液24h时的pH值、乙丙比、异丁酸和戊酸产量(P<0.01),显著降低了乳酸、乙酸、丙酸、丁酸和TVFA产量(P<0.01),但对异戊酸浓度无显著影响(P=0.794)。体外发酵动力学参数显示,添加阿卡波糖显著降低了前24小时瘤胃微生物的产气速率(P<0.01)。试验结果说明,阿卡波糖可有效降低瘤胃微生物的发酵活力,降低前24h瘤胃微生物的产气速率,有预防瘤胃酸中毒发生的潜力。