无患子皂苷分离鉴定及除草活性验证

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无患子(Sapindus mukorossi Gaertn.)是无患子属落叶乔木,其主要分布地包括我国长江流域以南,还有中南半岛、印度和日本等地。无患子提取物在医药健康和日化清洁等领域均有较为广泛的应用。无患子中富含皂苷类物质,是一类天然的非离子表面活性剂,同时还具有多种生物活性。已有研究发现无患子提取物具有除草活性,但其中发挥除草活性的成分尚不明确,且未见对无患子提取物与化学农药二甲戊灵复配制剂的除草活性研究。因此,本研究以无患子提取物为研究对象,采用高速逆流色谱法、液相色谱-质谱联用法、核磁共振等技术,分离、鉴定无患子皂苷成分,并进行除草活性试验,以无患子提取物与化学农药二甲戊灵进行复配,进行室内盆栽除草研究,并以无患子提取物水剂开展田间除草药效实验。本研究旨在明确无患子植物的除草活性成分及无患子提取物与二甲戊灵复配后的除草效果,为无患子植物资源的高值化利用提供理论依据。主要结果如下:(1)建立了无患子皂苷成分的高速逆流色谱分离纯化方法,成功分离鉴定出1种主要皂苷成分,并进行除草活性研究。高速逆流色谱分离纯化方法得到优化,其中溶剂体系为正己烷﹕乙酸乙酯﹕甲醇﹕水=1﹕4﹕1﹕4,流动相流速为3 m L/min,主机正转且转速为900 rpm。在优化后条件下,从无患子70%乙醇馏分中成功分离、鉴定出化合物A为常春藤皂苷元-3-O-β-D-吡喃木糖(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖,分子量为882,分子式为C46H74O16。除草试验结果表明,化合物A的除草活性强于无患子70%乙醇馏分,说明鉴定出的化合物A是无患子除草活性成分之一。(2)通过室内盆栽试验,评价了无患子提取物与二甲戊灵复配的除草活性。以单子叶植物狗牙根和双子叶植物红三叶为供试植物,无患子提取物的质量浓度为300 mg/L,与二甲戊灵制剂复配,以施药后14 d和21 d的鲜重防效为指标,对不同稀释倍数的复配制剂进行除草活性研究。结果表明,当二甲戊灵的用量为推荐使用剂量的50%时,其鲜重防效达90%以上,证明无患子提取物对二甲戊灵具有增效作用,因此,无患子提取物可以作为除草剂助剂与二甲戊灵复配,起到增效作用,实现化学除草剂二甲戊灵减量使用的目的。(3)无患子提取物水剂的田间药效试验。以胡萝卜作为试验作物,以田间实际杂草牛筋草、香附子、铁苋菜、小酸浆和其他杂草作为防治对象,以化学除草剂33%二甲戊灵EC作为阳性对照,采用播后苗前喷雾施药的方法,评价了不同剂量下无患子提取物水剂的田间除草效果,以施药后30 d和45 d的株防效和45 d的鲜重防效为指标,结果表明,无患子提取物水剂的施药剂量为1500 g a.i.·ha-1时,株防效分别最高可达到72.2%,鲜重防效为78.7%。其中,在45 d时对铁苋菜的鲜重防治效果可达88.5%,优于阳性对照二甲戊灵。因此,无患子提取物适合作为胡萝卜田的除草剂或除草剂助剂使用。综上所述,本研究优化建立了高速逆流色谱分离制备无患子皂苷成分的方法,鉴定出1种主要除草活性皂苷,明确了无患子提取物与化学农药二甲戊灵复配的除草增效作用,无患子提取物水剂具有一定的田间除草药效,研究结果为无患子资源在除草领域的应用提供了科学依据。
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