高迁移率族蛋白B1在脓毒症大鼠心肌组织及血清中的表达特点及意义

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目的:初步探索高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在脓毒症大鼠心肌组织中的表达特点,同时了解其在脓毒症大鼠血清的表达情况,为进一步研究HMGB1在脓毒症心肌抑制中的作用提供基础资料。方法:选择SPF级Wistar成年大鼠80只为研究对象,分正常对照组(10只)、假手术组(10只)及盲肠结扎穿孔组(简称CLP组,60只),CLP组有CLP2h、CLP6h、CLP12h、CLP24h、CLP48h及CLP72h组6小组。盲肠结扎穿孔法制作脓毒症大鼠模型,正常对照组做平行对照,假手术组仅行开关腹术。酶联免疫吸附法检测脓毒症大鼠血清HMGB1水平,实时荧光定量PCR法从基因水平检测脓毒症大鼠心肌组织HMGB1mRNA含量,免疫组化法在蛋白水平了解HMGB1在脓毒症大鼠心肌组织表达情况。结果:实验大鼠心肌组织HMGB1mRNA含量:假手术组为0.92±0.17, CLP2h组~CLP72h组依次分别为1.06±0.06、1.20±0.43、1.43±0.34、2.74±0.28、4.69±0.29及3.32±0.12,心肌组织HMGB1基因在CLP组相对升高有统计学意义,在CLP24h组明显升高,CLP48h组达到高峰,CLP72h组其含量仍维持在较高水平;CLP组大鼠心肌组织不同程度水肿、血管扩张充血,小灶中性粒细胞浸润(HE)。HMGB1胞浆表达在CLP24h、CLP48h、CLP72h三组,均有明显阳性表达(IHC);实验大鼠HMGB1血清水平:正常对照组为49.53±10.57pg/ml,假手术组为54.41±7.50pg/ml, CLP2h~CLP72h组依次分别为61.78±12.19pg/ml、68.84±8.80pg/ml、79.70±8.79pg/ml、190.65±7.21pg/ml、433.39±48.24pg/ml、384.16±26.81pg/ml。CLP组大鼠HMGB1血清水平升高有统计学意义,在CLP48h组值最高,CLP72h组仍处于高表达水平。结论:脓毒症大鼠心肌组织HMGB1mRNA含量及血清HMGB1水平在CLP24h组明显升高,在CLP48h组达峰,在CLP72h组仍然维持在较高水平,并且HMGB1在脓毒症大鼠心肌组织胞浆中阳性表达明显增强,提示我们有必要进一步研究HMGB1在脓毒症心功能障碍中的作用,造模后24小时到72小时是研究HMGB1与脓毒症心肌抑制相关性的重点阶段。
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