血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)最初是被用来作为一种降压药，不久人们就发现它有助于改善充血性心衰的血流动力学状态、提高生存质量、延长生命。心肌梗塞后一个重要的病理变化是心功能失调，左室心肌重构。而用ACEI可以显著减轻左室重构，降低致残率。进一步的研究发现ACEI可以减少急性心血管事件的发生，降低再梗塞率，这一现象提示ACEI可能还具有抗心肌缺血作用。组织因子是外源性凝血途径的启动子，在动脉粥样硬化斑块破裂血栓形成从而导致急性心血管事件中起着非常关键的作用。正常情况下体内单核细胞并不表达组织因子，但在某些病理因素刺激下可诱导合成，同时活化的单核细胞可表现出RAS系统的许多特征，包括肾素、血管紧张素、血管紧张素转换酶(ACE)、Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体，因而本实验研究ACEI类药物Fosinopril,Captopril及ARB类的Valsartan能否调节单核细胞表达组织因子，并探讨其中的机制和潜在的治疗价值。第一部分 ACEI及ARB对单核细胞组织因子促凝活性的影响 从健康平产孕妇脐静脉取得脐血，分离、计数单个核细胞3×10~6/mL，分组培养，以单纯LPS(0.1μg/ml)刺激作为对照，其它组分别再加入ACEI类药物Fosinopril (20μg/ml)、Captopril(20μg/ml)及Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)Valsartan(20μg/ml)，孵育4小时。冻融法收集细胞裂解液，一期凝固法分析LPS诱导单核细胞表达的组织因子促凝活性。Fosinopril(20μg/ml)可抑制这种活性约60％，且这种作用呈量效关系。 浙江大学2002 博上学位论文 Captopril（20 v g／hl）、Valsartan（20 n g／ml）也产生类似的作用。 第二部分ACEI及ARB对单核细胞表达TFmJRNA的影响 用敏感的RT—PCR技术，观察各组表达TFmRNA，并以GAPDH作为 内参照进行半定量分析。结果显示 FOsillopfil（20if g／ml）、C。ptopfil（20卜 g／ml）、Valsartan（20 P g／ml）可显著下调由 LPS诱导的单核细胞表达 TFmRNA。 第H部分ACEI及ARB对单核细胞转录因于作用的影响 在本部分我们用 Western Blotting 的方法研究 Fosinoprll、Captoprll、 Valsartan对单核细胞由 LPS诱导的转录因子 NF。B活性的影响。NF。B 是一个普遍存在的转录调节因子家族，许多基因的转录受 NF－K B的调控。 c－Rel怔5是家族成员之一，它由 p50和 p65两个异二聚体组成，抑制蛋白 1 。B a与它们结合在一起存在细胞质中。TF基因的转录受 c－Rel／p65调控，单 核细胞受 LPS刺激后转录因子被激活，首先是互。B a磷酸化而降解，p65易 位至细胞核内与TF基因转录启始位点结合启动转录。结果发现，Fosinopril、 Captopril． Valsartall可减弱互。B a的降解，抑制 p65由胞浆转至核内。 本研究证实Fosinopril、Captopril及Valsartan具有调节单核细胞表达 组织因子的潜在能力。可以认为这类药物的抗缺血作用至少在部分上与它们 可以降低单核细胞表达组织因子有关。这一发现对我们进一步认识粥样硬化 斑块破裂血栓形成及采取相应的治疗措施具有重要的意义。单核一巨噬细胞 是粥样斑块处的主要细胞成份，而斑块处又有大量ACE的聚积，因此只要能 够抑制斑块局部血管紧张素＊的生物合成或其活性，斑块局部与单核细胞相 关的TF含量就会减少。各种急性冠脉事件往往是因为斑块局部含大量TF， 斑块一旦破裂，TF启动异常的病理性凝血并和局部血小板大量沉降、聚积一 起形成血栓，从这一点来说ACEI及ARB对冠心病人具有重要的治疗价值。