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目的:研究九香虫水提液对生殖系统损伤的雄性大鼠生殖的保护作用。方法:50只雄性SD大鼠(体重180-200g),随机分为空白对照组(Control)、模型组(Mn)和九香虫低、中、高剂量干预组(即Asp50+Mn,Asp100+Mn,Asp200+Mn),10只/组。模型组和九香虫干预组腹腔注射等容的30mg/kg的氯化锰溶液(Mn Cl2·4H2O)5d/w,1次/d,共2周;同时灌胃给予蒸馏水和相应剂量的九香虫水提液(50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg),空白对照组给予生理盐水(NS),7d/w,1次/d,共4周。观察和检测SD大鼠的生殖能力指标(大鼠精子数目、睾丸和附睾的脏器系数等),取各组雄性SD大鼠睾丸和血清做以下检测:1.苏木精-伊红(HE)染色观察睾丸结构;2.Western blot和免疫组化法检测睾丸凋亡相关蛋白和基因Bcl-2、Bax、P-p53、Cytochrome C(Cyt C)、Cleaved Caspase-3(C-Cas3)的表达情况;3.WST-1法检测大鼠血清和睾丸T-SOD活力;4.酶促法检测大鼠血清和睾丸GSH-PX活力;5.化学比色法检测大鼠血清和睾丸T-AOC活力;6.硫代巴比妥酸(TBA)法检测大鼠血清和睾丸MDA含量。结果:1、九香虫水提液对锰损伤的精子数和睾丸及附睾脏器系数的影响:模型组精子数量、睾丸及附睾脏器系数均低于九香虫干预组和空白组(P<0.05);2、九香虫水提液对锰损伤的睾丸组织形态的影响:九香虫水提液修复干预后,睾丸组织中生精上皮细胞增多,各级生精细胞排列有序,生精小管的管腔逐渐变小,基膜得以修复到完整,九香虫高剂量组的形态结构与空白对照组基本一致;3、九香虫水提液对锰损伤的睾丸和血清的抗氧化酶系统的影响:模型组的睾丸组织和血清中T-SOD、T-AOC、GSH-PX活力均组低于空白对照组和九香虫干预组(P<0.05),而模型组的MDA高于空白对照组和九香虫干预组(P<0.05);4、九香虫水提液对锰损伤的Bcl-2表达的影响:与模型组相比,对照组和各九香虫干预组Bcl-2的免疫组化阳性着色和蛋白相对表达量均较模型组偏高(P<0.05),且随九香虫水提液剂量的增加而增强(P<0.05);5、九香虫水提液对锰损伤的睾丸凋亡相关蛋白BAX、P-P53、Cyt C、C-Cas 3表达的影响:与模型组相比,对照组和各九香虫干预组BAX、P-P53、Cyt C、C-Cas 3的免疫组化阳性着色和蛋白相对表达量均较模型组偏低(P<0.05),并且随着九香虫水提液剂量的增加而减弱(P<0.05)。结论:1、九香虫水提液对生殖系统损伤雄性大鼠的精子数和睾丸及附睾脏器有明显改善;2、九香虫水提液修复雄性SD大鼠生殖系统损伤的机制可能为:(1)通过增加雄性大鼠血清和睾丸抗氧化酶活性,减少其体内氧化应激状态,阻止生殖系统的脂质过氧化而抑制生精细胞凋亡;(2)通过下调P-p53,抑制Bax表达,进而使Bcl-2表达增多,Bcl-2和Bax的异源二聚体增多,抑制生精细胞凋亡;同时,上调Bcl-2的表达抑制Cyt C的上调,阻止线粒体凋亡信号的传递,而其下游信号C-Cas-3的低表达抑制睾丸细胞凋亡。