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目的:研究灵芪颗粒的制备工艺、质量控制和对免疫功能低下小鼠免疫功能的调节作用、脾虚小鼠的胃肠运动及消化酶的影响,为灵芪颗粒的临床应用提供实验依据。方法:采用正交实验法,以黄芪甲苷及丹酚酸B的提取率为考察指标,优化灵芪颗粒的提取工艺;以粒度、吸湿性、成型率、溶化性为考察指标,单因素试验筛选了灵芪颗粒的赋形剂的种类及用量,确定了灵芪颗粒的最佳制剂工艺;采用HPLC法测定灵芪方中黄芪甲苷及丹酚酸B的含量,采用TCL法对灵芝、丹参酮IIA、淫羊藿苷进行定性鉴别。用环磷酰胺复制小鼠免疫功能低下模型,黄芪颗粒(1.5g·kg-1)、灵芪颗粒(相当于生药量9、4.5、2.3g·kg-1)灌胃给药,以细胞吞噬功能和T细胞亚群及其细胞因子、NK细胞为指标评价灵芪颗粒对小鼠免疫功能的影响;以环磷酰胺、60Co照射致小鼠骨髓造血功能低下模型,观察灵芪颗粒对小鼠血常规的影响;以大黄、利血平致小鼠脾虚模型,观察灵芪颗粒对小鼠耐缺氧能力和肠管运动的影响。结果:灵芪颗粒的最佳提取工艺为:M2N3P2Q2,即灵芪颗粒全方饮片以10倍量50%乙醇提取3次,每次1小时;最佳赋形剂为糊精,干膏:赋形剂比为1:1.25;选择蔗糖为矫味剂,干膏:矫味剂比为1:3。三批制备工艺验证结果表明该工艺稳定可行,合理可靠,所得颗粒剂各项参数稳定,符合中国药典颗粒剂项下标准。建立了黄芪甲苷、丹酚酸B含量测定方法,所建立的含量测定方法精密度、稳定性、重复性、加样回收率符合要求,灵芪颗粒中黄芪甲苷及丹酚酸B的含量分别为0.0699%、0.3891%。灵芪颗粒中灵芝、丹参酮ⅡA、淫羊藿苷的定性鉴别符合中国药典要求。环磷酰胺腹腔注射可导致小鼠免疫功能低下,灵芪颗粒能增加小鼠外周血白细胞和淋巴细胞计数,增强ConA诱导的脾T淋巴细胞转化能力、NK细胞活性,提高小鼠碳粒廓清指数、吞噬指数、脾指数和胸腺指数、HC50值、溶血空斑数。模型组小鼠CD3+增加,Th1/Th2降低,Th17细胞、Treg细胞、IL-17、IL-23升高。黄芪颗粒组和灵芪颗粒组CD3+降低、Th1/Th2细胞比值升高,Th17细胞、Treg细胞、IL-17、IL-23降低。环磷酰胺、60Co照射可导致小鼠外周血象显著降低,灵芪颗粒可明显升高小鼠外周血象(WBC、RBC和Hb)。脾虚小鼠耐缺氧能力降低、肠蠕动加快,灵芪颗粒能显著提高脾虚小鼠的耐缺氧能力,减慢肠管蠕动。结论:灵芪颗粒全方饮片以10倍量50%乙醇提取3次,每次1小时,提取工艺合理可靠,以灵芝、丹参酮ⅡA、淫羊藿苷进行定性鉴别和黄芪甲苷及丹酚酸B含量为质量标准,产品质量可控。灵芪颗粒可以增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能,降低CD3+、升高Th1/Th2细胞比值,改善外周血象和脾虚症状。