研究背景心房颤动(Atrial Fibrillation, AF)是一种以心房不协调活动而导致心房机械功能恶化为特征的室上性心动过速性心律失常。房颤是一种常见的心律失常,关于房颤的触发、驱动和维持机制目前仍不是很清楚,在触发、驱动机制方面,心脏腔静脉系统如冠状静脉、上下腔静脉、肺静脉系统等部位的灶性放电可触发阵发性房颤。此外心房肌迷走神经张力异常也可能和触发机制有关,在维持机制方面,近年来,由于对房颤研究的不断深入,心房重构(atrial remodeling)越来越受到重视,心房重构包括心房电重构(AER)和心房的结构重构(AAR)。病理学上房颤分为孤立性房颤和病理性房颤。在病理性房颤的发生和维持机制中,左心房扩大被视为最重要的因素之一。心房扩大一方面促进心房内形成多折返环,另一方面改变了心房肌的电生理特性。研究表明,心律失常更多地依赖于细胞间电激动的被动传导(即被动电生理活动),并且证实细胞间缝隙连接(Gap Junction GJ)作为细胞间的一种特殊通道介导着细胞间电和化学信号的传递,在维持电和机械耦联的正常进行以及确保心肌协调收缩方面起着重要作用。组成缝隙连接的蛋白简称连接蛋白(Connexion Cx),在人体心肌中,主要有Cx31.9、Cx37、Cx40、Cx43和Cx45五种连接蛋白,其中Cx43在四个心腔均分布丰富,Cx45主要分布在心肌传导束及蒲氏纤维,Cx40主要分布在心房肌,是心房电激动传导的关键蛋白。许多基础研究认为房颤发生后在数秒至数分钟内即出现离子的浓度、离子通道的活性和磷酸化改变,数小时至数天即出现离子通道的信使核糖核酸(mRNA)表达和蛋白表达改变,包括缝隙连接蛋白(Cx)的改变。随后出现心房肌细胞肥大、凋亡、炎性细胞浸润、间质纤维化。目前对缝隙连接蛋白Cx40、Cx43变化在风湿性心脏病房颤的发生中的作用有较多的研究报道,但缝隙连接蛋白Cx40、Cx43在冠心病房颤患者左、右心房肌中的表达、分布,Cx40重构与房颤及左心房大小的关系如何还少有报道。本研究将通过对比冠心病房颤患者左右心房肌中缝隙连接蛋白Cx40、Cx43, Cx40mRNA、Cx43mRNA的表达,变化及光镜、电镜下的结构重构,分三个部分对冠心病房颤的机制进行探讨。目的：观察冠心病窦性心律正常左房大小(SR)、窦性心律左房扩大(SR+LAD)、心房颤动并左房扩大者(AF+LAD)及风湿性心脏病心房颤动并右房扩大者(AF+RAD)左、右心房肌细胞缝隙连接蛋白(Cx40mRNA、Cx40)的表达变化,探讨Cx40mRNA、Cx40在左、右心耳肌中的表达,与左、右心房大小的关系及在冠心病房颤发生中的作用。方法：选择26例接受冠状动脉旁路移植术的冠心病患者和11例接受换瓣术的风心病患者为研究对象,37例患者术前均接受冠状动脉造影检查,根据心电图和心脏彩超资料分为四组：AF+LAD组11例,AF+RAD组11例,SR+LAD组8例,SR组7例,分别于手术中切取左、右心耳标本(左心房大小正常者一般只切取右心耳肌标本)。用RT-PCR方法及免疫印迹法(Western blot)检测Cx40mRNA、Cx40的表达。结果：1. Cx40mRNA、Cx40表达量均值在扩大的右心房和正常大小的右心房肌标本中有显著差异(P<0.01)。2. Cx40mRNA、Cx40表达量均值在SR+LAD、AF+LAD组左心耳肌标本中比较无显著性差异(P>0.05)。3. Cx40mRNA、Cx40表达量均值在SR+LAD、AF+LAD和AF+RAD组左心耳肌标本中与正常大小的右心耳肌标本比较明显降低,有显著性差异(P<0.01)。结论：1.左、右心房扩大后心房肌Cx40mRNA、Cx40表达下调。2.左心房扩大并房颤后Cx40mRNA、Cx40表达无进一步下调。3.心房扩大和Cx40表达下调可能是房颤的产生和维持的重要因素。目的：观察窦性心律正常左房大小(SR)、窦性心律左房扩大(SR+LAD)、心房颤动并左房扩大者(AF+LAD)及心房颤动并右房扩大者(AF+RAD)左、右心房肌细胞Cx43mRNA和Cx43表达的变化、探讨Cx43mRNA和Cx43表达的变化及在房颤中的作用。方法：选择26例接受冠状动脉旁路移植术的冠心病患者和20例接受换瓣术的风心病患者为研究对象,46例患者术前均接受冠状动脉造影检查,根据心电图和心脏彩超资料分为四组：AF+LAD组26例,AF+RAD组20例,SR+LAD组8例,SR组12例,分别于手术中切取左、右心耳标本(左心房大小正常者一般只切取右心耳肌标本)。用RT-PCR法检测Cx43mRNA表达,用免疫印迹法(Western blot)检测Cx43蛋白的表达。结果：Cx43mRNA和Cx43表达量均值在四组患者的左、右心房肌标本中采用方差分析及两-两比较均无显著差异(P>0.05)。结论：1.不论是否发生左、右心房扩大和房颤,左、右心房肌细胞中Cx43mRNA表达无明显变化。2.不论是否发生左、右房扩大和房颤,左、右心房肌细胞中Cx43表达无明显变化,3.左、右心房扩大和房颤对Cx43mRNA和Cx43的表达均无明显影响,说明Cx43mRNA和Cx43表达的变化对房颤的发生影响较少。目的：制备光镜、电镜标本,应用光镜、电子显微镜观察心房肌细胞、细胞间质及缝隙连接的结构变化,探讨心房肌细胞、细胞间质及缝隙连接重构的变化在房颤发生中的作用。方法：选择26例接受冠状动脉旁路移植术的冠心病患者和11例接受换瓣术的风心病患者为研究对象,37例患者术前均接受冠状动脉造影检查,根据心电图和心脏彩超资料分为四组：AF+LAD组11例,AF+RAD组11例,SR+LAD组8例,SR组7例,分别于手术中切取左、右心耳标本(左心房大小正常者一般只切取右心耳肌标本)。观察心房肌细胞的形态和大小、细胞核的异形和大小、细胞间缝隙连接的变化、细胞间质纤维化的比例及脂肪浸润情况。结果：1.光镜下左、右心房扩大患者心房肌细胞肥大、细胞核肥大异形、细胞间质纤维化和脂肪浸润程度与左、右心房大小正常的患者比较有显著差异(P<0.01)。2.电镜下心肌细胞肌原纤维溶解、断裂；线粒体数量明显增多,且大小不一；细胞核异型明显；闰盘扭曲,盘旋重叠,模糊、不连续；心肌间质纤维增生明显与左、右心房大小正常的患者比较有显著差异(P<0.01)。结论：左、右心房扩大后,心房肌细胞、细胞间基质及细胞间缝隙连接发生了重构,心房结构重构是导致房颤的发生和维持的重要因素。