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目的:研究苦参碱对横纹肌肉瘤细胞系RD的抑制增殖、诱导凋亡作用,并探讨凋亡相关蛋白Fas和caspase3在分子和转录水平的变化,为横纹肌肉瘤的治疗提供新的思路。 方法:分别以不同浓度的苦参碱处理人横纹肌肉瘤RD细胞,实验分为A(对照组)、B、C、D和E5组,其细胞培养液中苦参碱的药物终浓度分别为0、0.5、1.0、1.5和2.0mg/ml,共同培养24h后收集细胞,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率,应用Annexin-V和PI双染细胞流式法检测细胞凋亡率,RT-PCR方法检测Fas和caspase-3 mRNA的表达;Western blot法检测凋亡及信号通路相关蛋白FAS,caspase蛋白前体procaspase-3和caspase-3剪切片段的表达水平。 结果:1.实验组均可明显抑制RD细胞增殖,其增殖抑制率较对照组明显增加(P<0.01),随着苦参碱浓度的增加,其抑制率逐渐升高,2.0mg/ml苦参碱作用于RD细胞24 h以后细胞增殖抑制率为(50.49±0.076)%。2.实验组细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.01),细胞凋亡率与苦参碱呈浓度依赖性,2.0mg/ml苦参碱作用于RD细胞24 h以后细胞凋亡率为(39.43±0.487)%。3.实验组Caspase3和Fas mRNA的表达较对照组明显增加(P<0.01)。4.caspase蛋白前体procaspase3在苦参碱作用后表达水平下降,而Fas蛋白和激活后的活性片段caspase3则表达上调,实验组与对照组相比差异均具有统计学意义,组间两两比较也有统计学意义(P<0.01)。 结论:苦参碱能有效抑制RD细胞增殖、诱导其调亡,上述凋亡相关基因及信号通路相关蛋白可能参与了苦参碱抑制RD细胞增殖和诱导凋亡的过程。