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目的:B淋巴细胞刺激因子(B lymphocytestimulator,BLyS)和增殖诱导配体(a proliferation-inducling ligand, APRIL)是近年来发现的肿瘤坏死因子(TNF)家族的新成员。二者因具有高度同源性(48%基因序列相同,33%氨基酸相同)和共同的受体(BCMA和TACI)而关系密切。BLyS和APRIL通过与受体的结合影响B、T淋巴细胞的激活、增殖和存活而广泛参与免疫调节,尤其与免疫球蛋白分泌、自身抗体生成等体液免疫功能紊乱关系密切。已有研究发现BLyS/APRIL系统的异常与肿瘤和多种自身免疫性疾病的发生、发展有关。目前关于BLyS/APRIL系统与自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、干燥综合征等)关系的研究较多,而与多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)关系的研究尚少。本文以酶联免疫吸附实验(ELISA)检测并分析MM患者血清中BLyS和APRIL水平,探讨BLyS/APRIL系统在MM发病中的作用及其与临床肿瘤负荷及预后指标的相关性。方法:1标本的采集用真空采血管分别抽取健康成年人(即对照组,14例)和多发性骨髓瘤患者(实验组,14例)静脉血4ml,14例患者分别抽取其治疗前(即初治组),治疗3个疗程后(即治疗中期组)和治疗6个疗程后(即治疗后期组)的血液标本。血液离体后室温放置30分钟,2000r/min离心15分钟,取上层血清分装于1.5ml的离心管中。标本放入-80℃的低温冰箱中保存备用。2酶联免疫吸附法检测血清BLyS、APRIL水平,同时检测血清IL-6水平。样本孔内加入100ul的蒸馏水后加入50ul的血清样本,室温孵育三小时,倒掉孔内液体并用洗液缓冲液清洗6次,每个孔内加入100ul的TMB,室温孵育10分钟后加入100ul的反应终止液,于450nm的地方读取吸光值,测定健康对照者和多发性骨髓瘤患者初治组、治疗中期组及治疗后期组血清中BLyS、APRIL及IL-6的浓度变化。3放射免疫分析方法测量血清β2-微球蛋白含量取样本50μl加入聚苯乙烯试管中,同时加入抗血清100μl及125I-β2-微球蛋白100μl,混匀后室温静止30至60分钟,再加入PR分离液500μl混匀后室温静止15分钟,离心3500rpm/min 15分钟,吸弃上清,放入放免仪读数,计算健康对照者及多发性骨髓瘤患者初治组、治疗中期组及治疗后期组的外周血β2-微球蛋白含量。4统计临床资料LDH、肌酐、白蛋白、免疫球蛋白、钙离子浓度、血红蛋白、骨髓中浆细胞百分比等数据均采用患者及健康对照者入院检查的相关化验结果。5测量所有数据均采用SPSS13.0统计软件处理,计量资料以均数±标准差(x±s)来表示;组间样本比较采用两个独立样本的t检验及重复测量的方差分析;组内样本各个指标之间采用pearson相关性分析。检验差异的显著性用P值表示,P<0.05表示差异显著,有统计学意义。结果:1多发性骨髓瘤患者初治组血清BLyS浓度(1.102±0.446 ng/ml)显著高于治疗中期组(0.595±0.184 ng/ml)、治疗后期组(0.355±0.083 ng/ml)和对照组(0.641±0.401 ng/ml),差异有显著性(p<0.05);治疗中期组的BLyS浓度显著高于治疗后期组,两者之间差异有显著性(p<0.05);治疗中期组及治疗后期组的BlyS水平与对照组之间没有差异(p>0.05);初治组血清APRIL浓度(1.417±0.391 ng/ml)显著高于治疗后期组(1.061±0.117 ng/ml)和对照组(1.222±0.317 ng/ml),差异有显著性(p<0.05);初治组血清APRIL浓度与治疗中期组(1.401±0.191 ng/ml)之间没有差异(p>0.05);治疗中期组的APRIL浓度显著高于治疗后期组及对照组,差异有显著性(p<0.05);治疗后期组与对照组之间的APRIL浓度没有差异性(p>0.05)。2多发性骨髓瘤患者初治组血清β2-MG浓度(5.114±0.804μg/ml)显著高于治疗中期组(1.984±0.409μg/ml)、治疗后期组(2.011±0.518μg/ml)和对照组(2.755±1.469μg /ml),差异有显著性(p<0.05);治疗中期组血清β2-MG水平与治疗后期组及对照组之间没有差异(p>0.05);治疗后期组与对照组之间的β2-MG浓度没有差异(p>0.05)。3我们通过总结临床病例得到LDH的数据经分析后得出以下结果:多发性骨髓瘤患者初治组血清LDH浓度(360.071±90.620 U/L)显著高于治疗中期组(189.507±34.893 U/L)、治疗后期组(150.064±15.385 U/L)和对照组(150.071±33.253 U/L),差异有显著性(p<0.05);治疗中期组血清LDH水平显著高于治疗后期组及对照组,差异有显著性(p<0.05);治疗后期组的LDH水平与对照组之间没有差异(p>0.05)。4患者组外周血IL-6的浓度是16.902±6.025 pg/ml。5患者组外周血BLyS浓度和APRIL浓度之间呈正相关(p<0.05);6 BLyS的浓度与外周血中ALB呈负相关(p<0.05);与外周血中IL-6、β2-微球蛋、LDH、免疫球蛋白、骨髓中浆细胞百分比、肌酐均呈正相关(p<0.05);与外周血血清中钙离子及血红蛋白含量之间无相关性(p>0.05)。7 APRIL的浓度与外周血中ALB呈负相关(p<0.05);与外周血中IL-6、β2-微球蛋白、LDH、免疫球蛋白、骨髓中浆细胞百分比、肌酐均呈正相关(p<0.05);与外周血血清中钙离子及血红蛋白含量之间无相关性(p>0.05)。结论:1、BLyS和APRIL在多发性骨髓瘤患者的外周血中高表达,并随着其病情的好转而逐渐下降,提示BLyS和APRIL与多发性骨髓瘤发病有关。2、血清中BLyS和APRIL与MM患者预后指标和肿瘤负荷指标都具有相关性,从而我们认为BLyS或APRIL也可以作为评价MM预后的新指标。