目的:阿霉素是蒽环类抗生素,作为一种治疗效果确切的抗肿瘤药物,自从上市以来,已经与其它药物联合应用形成了多种肿瘤的标准治疗方法。但阿霉素也具有蒽环类抗生素共有的心脏毒性,而这一缺点长久以来一直限制着阿霉素的临床应用,也一直是化学结构改造和新剂型研发工作的焦点。针对其良好的治疗效果和显著的心脏毒性这两个特点,本试验尝试研制长循环脂质体剂型的阿霉素制剂,充分利用这一剂型长循环的特点发挥阿霉素治疗效果的优势,利用这一剂型改变组织分布的靶向性特点来降低阿霉素心脏毒性。阿霉素长循环脂质体一方面减小毒性提高疗效,另一方面延长了给药间隔方便使用。方法阿霉素长循环脂质体检测方法:试验根据阿霉素和磷脂材料的性质,以酸化异丙醇为溶剂,选用紫外分光光度法检测阿霉素长循环脂质体的药物含量。本方法的标准曲线为A=0.168C+0.0018,方法回收率为100～102%,日内精密度为RSD<1%,日间精密度为RSD<1%。试验选用葡聚糖凝胶色谱法分离检测阿霉素长循环脂质体的包封率、释放度,根据制剂的性质,以合适的凝胶、柱高、流动相和流速条件,取得良好的分离效果,柱回收率为99～101%,加样回收率为99～100%。试验使用90Plus Particle来检测阿霉素长循环脂质体的粒径大小和分布。阿霉素长循环脂质体的制备:试验根据阿霉素的性质,选用较成熟的薄膜超声法制备空白脂质体,用铵离子梯度法包封药物。先根据阿霉素长循环脂质体的处方和制备工艺,选取10个因素进行单因素试验。试验结果表明,有机溶剂、转膜温度和转速仅仅影响成膜速度,并没有影响薄膜的质量,包封时间对包封率也没有影响,根据磷脂的特点确定具体条件为溶剂是乙醇异丙醇(1: 3)、55?C、110rpm、30min。聚乙二醇—二硬脂酰磷酰乙醇胺的用量对包封率、释放度没有影响,确定比例为1:4。而超声时间对于制备空白脂质体有影响,根据磷脂和工艺过程确定时间为4小时。再以没有确定的4个因素药脂比、胆固醇与磷脂比例、硫酸铵浓度和包封温度为进一步考察对象,设计4因素3水平正交试验,通过试验得到最优结果:药脂比为1: 6,胆固醇与磷脂比例为1:3.5,硫酸铵浓度为175mmol/L,包封温度为70?C—与其它6个条件形成了完整的阿霉素长循环脂质体的处方和制备工艺条件。最后,应用这一优化条件制备3批阿霉素长循环脂质体。阿霉素长循环脂质体的稳定性试验:根据阿霉素长循环脂质体的特点,确定制剂的外观、pH值、粒径大小和分布、包封率、释放度、药物含量为考察指标,进行考察,结果为:阿霉素长循环脂质体为红色透明液体,PH值为6.5,粒径为120nm,为正态分布,分布范围40nm,包封率在95%以上,1小时释放度为40%±10%,4小时释放度为60%±10%,药物含量为2mg/ml±0.1mg/ml。在4?C,进行长期试验,6个月后,各项指标保持稳定,在25?C,进行加速试验,3个月后,阿霉素长循环脂质体溶液保持红色,包封率基本没有变化,释放度基本没有变化。结果说明阿霉素长循环脂质体稳定性良好。阿霉素长循环脂质体的药物动力学试验:参考文献资料,根据阿霉素和血浆、组织匀浆的性质,试验选用内标法,以柔红霉素为内标物,建立了HPLC检测血浆和组织匀浆中阿霉素含量的方法,血浆的标准曲线为Y=0.1808X+0.036,r=0.9766,方法回收率大于95%,日间精密度和日内精密度小于5%。为了检测阿霉素长循环脂质体的长循环效果,以180—220g Wistar大鼠为试验对象,将12只大鼠随机分为两组,各6只。一组以阿霉素普通制剂为对照品,另一组给予阿霉素长循环脂质体。给药后,分别在0、0.08、0.25、0.5、1、2、4、8、12、24、48小时取样,用HPLC法检测,结果为阿霉素普通制剂的AUC(h·μg/mL)为61.985、t1/2α(h)为1.577, t1/2β(h)为28.55 ,CL(mg/kg/ml/h)为0.081,阿霉素长循环脂质体的AUC(h·μg/mL)为4856.414、t1/2α(h)为6.667, t1/2β(h)为116.705, CL(mg/kg/ml/h)为0.001,结果说明,阿霉素长循环脂质体显著具有长循环效果,相对于阿霉素普通制剂,明显延长了半衰期。为了检测阿霉素长循环脂质体减小心脏毒性的效果,以18-21g昆明小鼠为试验对象,将72只小鼠随机分为两组,各36只。一组以阿霉素普通制剂为对照品,另一组给予阿霉素长循环脂质体。给药后,分别在0.08、1、4、6、24、48小时取样,用HPLC法检测,结果为阿霉素普通制剂的AUC(h·μg/mL)为411,阿霉素长循环脂质体的AUC(h·μg/mL)为282。结果说明阿霉素长循环脂质体显著降低了心脏毒性。结论:以上试验结果说明自制阿霉素长循环脂质体具有良好的稳定性,达到了长循环和减少心脏毒性的目的。