我国规模化猪场普遍采用三阶段饲养模式,但由于阶段太少,它不能完全满足其营养需求,会造成阶段性营养供给不足或营养供给过剩,限制猪只最佳生长性能,因此,不少学者开始关注多阶段饲养。然而,目前对五阶段饲养的研究报道较少。因此,本试验在现行普遍采用的三阶段饲养模式的基础上,探讨五阶段饲养模式对生长肥育猪生长性能、免疫功能和肠道健康的影响,同时利用16S r RNA测序和血浆代谢组学分析五阶段饲养模式对生长肥育猪肠道微生物区系和血浆代谢产物的影响,为五阶段饲养模式在生猪健康养殖中的应用提供理论支撑。试验一探究了三阶段、五阶段饲养模式对生长肥育猪生长性能、免疫功能及肠道健康的影响。选取240头健康且体重相近的80日龄长大二元杂交生长肥育猪,随机分为2组,每组8个重复,每个重复15头。分为对照组(三阶段饲养模式)和试验组(五阶段饲养模式),试验期为100d。主要结果如下:(1)在整个饲喂过程中,与三阶段组相比,五阶段组对生长肥育猪的ADG、ADFI、F/G、单位增重粗蛋白摄入量(g/kg)的影响差异均不显著(P>0.05),但在不影响猪只正常生长性能的前提下,ADFI、F/G、单位增重粗蛋白摄入量(g/kg)均稍有降低的趋势。(2)两种饲养模式对生长肥育猪器官指数和各肠段内容物p H值均没有显著性影响(P>0.05)。其中与三阶段组相比,五阶段组能极显著提高血清中Ig M水平(P<0.01),对血清中Ig A、Ig G水平及空肠组织中s Ig A的含量稍有升高的趋势,并且五阶段组血清中IL-1β、TNF-α、IL-6水平及结肠组织中IL-1β、TNF-α和IL-6m RNA表达水平均低于三阶段组,而IL-10及IL-10 m RNA表达水平均高于三阶段组,但差异均不显著(P>0.05)。(3)两种饲养模式对生长肥育猪血清中内毒素、D-乳酸水平以及结肠内容物中SCFAs的浓度均无显著性影响(P>0.05);五阶段组空肠组织中SOD、GSH-PX、T-AOC含量均高于三阶段组,而MDA含量低于三阶段组,但差异均不显著(P>0.05);在此基础上,进一步通过荧光定量PCR检测了与抗氧化相关基因的m RNA表达水平,结果显示,与三阶段组相比,五阶段组能显著提高Nrf2和NQO1m RNA表达水平(P<0.05),对CAT1、GSH-PX1、SOD1、SOD2、SOD3、HMOX-1m RNA表达水平有升高的趋势,而降低KEAP1 m RNA表达水平,但差异均不显著(P>0.05)。试验二探究了三阶段、五阶段饲养模式对生长肥育猪肠道微生物区系及血浆代谢物的影响。主要结果如下:(1)通过16Sr RNA测序发现,在155d共产生2224个OTUs,两组共有1605个核心OTUs,而在180d共产生2093个OTUs,两组共有1596个核心OTUs;在155d和180d,两组样品之间Alpha多样性指数差异均不显著(P>0.05),但基于加权的Uni Frac距离分析样品间物种组成的聚类树发现在155d各组间聚类情况较好且明显区别与另外一组,而在180d聚类效果不如155d明显,表明经过一段时间相同饲料的饲喂,两组样品间物种组成可能会出现一定程度上的趋同性。(2)在门水平上,肠道细菌的相对丰度差异均不显著(P>0.05),但在155d对科、属、种水平上进一步分析发现,五阶段组中Lactobacillaceae科、Lactobacillus属和Lactobacillus＿salivarius的相对丰度均显著高于三阶段组(P<0.05),而在180d,五阶段组中这些肠道细菌的相对丰度仍高于三阶段组,但差异不显著(P>0.05)。(3)非靶向代谢组学分析在155d共筛选到差异显著的代谢物有592个,而在180d,共筛选到差异显著的代谢物有345个,并对差异代谢物代谢通路富集分析发现,在155d,五阶段饲养模式主要影响生长肥育猪的氨基酸代谢、Gn RH信号通路、类固醇激素的生物合成、三羧酸循环、矿物质吸收、FcγR介导的吞噬作用等代谢通路;在180d,主要影响生长肥育猪氨基酸代谢、Gn RH信号通路、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、Fox O信号通路、FcγR介导的吞噬作用等代谢通路。综上所述,本研究主要结论如下:(1)五阶段饲养模式在不影响正常生长性能的前提下,可能会改善生长肥育猪的免疫功能,并通过Nrf2-Keap1这一信号通路调节空肠组织的抗氧化能力。(2)五阶段饲养模式在155d可显著提高Lactobacillaceae科、Lactobacillus属和Lactobacillus＿salivarius的相对丰度,而在180d可显著降低streptococcus＿alactolyticus的相对丰度。(3)相比与三阶段饲养模式,五阶段饲养模式在155d和180d两个时间点上主要影响生长肥育猪氨基酸代谢、Gn RH信号通路、FcγR介导的吞噬作用等代谢通路。