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木槿(Hibiscus syriacus Linn.)属于锦葵科木槿属,是一种庭园常见的灌木花种,广泛分布于我国热带和亚热带地区。木槿花花色艳丽,花期长,产量高,肉质肥厚,既可以入药,也可以食用。随着美丽乡村建设的推进,木槿种植面积不断扩大,花产量也逐年提高,但绝大部分木槿花并没有得到规模化利用,而是任其凋零败落,浪费了宝贵的资源。因此,本文对木槿花的抗氧化活性及其物质基础进行了比较研究。(1)5个木槿品种花卉的生物活性物质比较研究表明,其总酚和总黄酮含量从高到低依次为木槿原种、粉紫重瓣木槿花、薰衣草薄绸木槿花、紫玉和雅致木槿,各品种的抗氧化活性排序与它们的总酚和总黄酮含量排序基本相一致,其中木槿原种的总酚和总黄酮含量最高,分别达到了 17.33 mg GAE/g和12.68 mg RE/g,且抗氧化活性最强,总还原能力(ferric ion reducing antioxidant power,FRAP)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)自由基清除能力分别为 1.58 mmol FeSO4/g、6.82 mg TE/g、17.96 mg TE/g。木槿花的抗氧化活性与其总酚和总黄酮含量间有极显著的相关性(P<0.01),与花青素含量相关性不显著(P>0.05)。在单因素试验基础上,利用响应面法优化木槿原种花活性物质的提取工艺,得到最佳提取工艺参数为:液料比37:1(mL/g),提取时间47 min,乙醇浓度为73%,超声功率125 W。在此优化工艺条件下,木槿花中的总黄酮得率为16.27 mg/g,总酚得率为19.19 mg/g。木槿原种花不同极性溶剂萃取物均具有一定的抗氧化活性,其中正丁醇萃取相的总还原能力(6.16 mmol FeS04/g)最高,且对DPPH(15.50mgTE/g)和ABTS(40.71mgTE/g)自由基清除效果最好。不同极性溶剂萃取物中活性物质含量与抗氧化活性间的相关性表明,抗氧化活性(FRAP法、DPPH法和ABTS法)与总黄酮含量有极显著相关(P<0.01),相关系数R分别为0.837、0.915和0.762(P<0.01),由此表明木槿花抗氧化活性的物质基础主要源于黄酮类化合物。(2)利用大孔树脂对木槿花黄酮进行分离纯化,结果表明X-5树脂最适宜用于纯化木槿花黄酮,纯化过程采用0.5 mg/mL的黄酮提取液,以6 BV/h的流速上样,水洗体积为4 BV,以95%的乙醇溶液进行动态洗脱,洗脱液流速为2.5 BV/h,洗脱剂用量为80 mL,可使木槿花黄酮含量增加至61.32 mg/g。(3)采用高效液相色谱(HPLC)和高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱仪(HPLC-QTOF)对抗氧化活性最强的正丁醇萃取物进行分析,并结合标品对比,初步鉴定出8种抗氧化物质:山奈酚-O-六碳糖-C-六碳糖苷、芹菜素、山奈酚-O-六碳糖-C-六碳糖苷同分异构体、芹菜素-C-二糖苷、芹菜素-葡萄糖芹糖苷、山萘酚-3-O-芸香糖苷、芹菜素-7-O-芸香糖苷、矢车菊素-3-丙二酰葡萄糖苷。