人参美白活性物质研究

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目的:寻找人参中具有美白作用的活性物质,并运用现代生物技术手段提取分离及纯化其有效成分。方法:应用生化酶学法测定美白物质对酪氨酸酶活性的抑制率,优化最佳实验条件。采用不同提取方法、不同料液比、不同提取时间、不同提取次数提取人参美白粗提物,以对酪氨酸酶活性的抑制率为评价指标优选最佳提取方法。应用醇沉法、硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、C18反相硅胶柱层析、高效液相色谱等分离分析技术对人参美白活性物质进行分离纯化。结果:1优化出测定酪氨酸酶活性抑制率的最佳实验条件为L-酪氨酸的量0.0754mg/mL、酪氨酸酶的量0.1082mg/mL、恒温时间10min、反应时间5min;2优选出提取人参美白粗提物的最佳提取方法为水煎煮法提取3次,每次2h,料液比1:10,采用此方法提取的人参美白粗提物对酪氨酸酶活性的抑制率为8.11%,收率为9.73%;3人参美白粗提物经不同醇沉法分离,优选出分步梯度醇沉法为最佳分离方法,分离得到的人参醇溶物对酪氨酸酶活性的抑制率为18.61%,收率为3.38%;4人参醇溶物经硅胶柱层析得到的有效组分为Ⅱ号和Ⅲ号组分,对酪氨酸酶活性的抑制率分别为37.99%和37.32%,Ⅱ号和Ⅲ号合并组分的收率为0.27%;5有效组分经Sephadex LH-20柱层析得到D组分,对酪氨酸酶活性的抑制率为76.79%,收率为0.058%;6D组分经C18反相硅胶柱层析纯化得到有效成分D6,对酪氨酸酶活性的抑制率为83.25%,收率为0.012%;纯化后的有效成分经薄层检测为一个斑点,HPLC检测为单一谱峰,保留时间为9.32min;结论:应用生化酶学法追踪检测有效成分对酪氨酸酶活性的抑制率,建立了一条稳定、可行的人参美白活性物质的提取分离纯化工艺。纯化后的有效成分达到了色谱纯,并具有良好的美白效果。本研究为人参在美白化妆品中的应用提供了科学依据,同时为人参美白化妆品的进一步开发奠定了实验基础。
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