论文部分内容阅读
多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua),隶属百合科(Liliaceae)黄精属(Polygonatum),性平、味甘,具有补肾益精、降血糖、降血压、降血脂、提高人体免疫力、抗衰老、抗肿瘤等功效,是药食同源的多年生草本植物,为中国传统大宗药材,具有很好的开发与应用价值。多花黄精中的甾体皂苷主要有薯蓣皂苷、薯蓣皂苷元等,具有降血糖、抗肿瘤、抗HIV的生物活性。在人工栽培中受种子发芽率低下、育苗周期长等因素影响,多花黄精通过自然繁殖的方式无法满足市场需求。较传统栽培方式,组织培养不受季节、取材数量等因素制约,可在短期内大规模繁殖性状稳定的优良种苗。同时毛状根具有生长速度快、合成次生代谢物质能力强且稳定等优点,因此,可以利用毛状根液体培养技术生产甾体皂苷。本研究建立UPLC法同时测定多花黄精野生植株和毛状根中薯蓣皂苷和薯蓣皂苷元的含量,为黄精资源的利用提供科学依据。研究结果如下:1.低温沙藏、培养基中添加不同浓度激素处理种子,找出萌发率较高的处理方法,即0℃沙藏100d,接种到MS+2.0mg/L6-BA培养基中,野生多花黄精种子发芽率最高,达到43.7%。2.通过三因素三水平正交实验,筛选出多花黄精最适快繁培养基配方为:MS+1.0 mg/L 6-BA +0.5 mg/L NAA +0.3 mg/L IAA,芽增殖系数达到 3.2,并且长势良好;最适生根培养基为1/2MS+1.0mg/LNAA,平均生根率达到86.92%;炼苗最适基质为泥炭土:沙子2:1。3.采用正交设计方法,探究毛状根最佳液体培养条件:培养基为液体1/2 MS,pH为5.8,摇床转速150 r/min,26℃暗培养,增殖倍数达到9.4。4.优化超声波法提取甾体皂苷的提取方法,以75%的乙醇作为提取剂,料液比1:15,超声2 h后,用正丁醇萃取。5.采用超高效液相色谱法(UPLC)对多花黄精野生植株和毛状根中薯蓣皂苷和薯蓣皂苷元含量进行统计分析,野生植株根茎中薯蓣皂苷和薯蓣皂苷元含量分别为106.27 μg/g、84.95μg/g,毛状根中薯蓣皂苷和薯蓣皂苷元含量分别为 89.13 μg/g、72.24μg/g。