五味子“五味”物质基础研究

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五味子为木兰科五味子属落叶藤本植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实[1]。主产于东北等地。五味子为著名中药,有收敛固涩,益气生津,补肾宁心之功效。用于久喘虚咳,梦遗滑精,遗尿尿频,久泻不止,自汗盗汗,津伤口渴,内热消渴,心悸失眠[2],《神农本草经》列其为上品,在我国有悠久的药用历史,是我国常用的大宗中药材之一。  五味子“五味”俱全,因此具有多种生物活性,在临床上得到广泛应用。五味子的化学和药理作用研究虽多,但主要是集中在粗提物和单一成分上。五味子产品往往是利用了其一部分物质功效的同时,又忽视了另一部分物质的作用,严重地影响到五味子产品的有效性,其主要原因是五味子“五味”的物质基础的性质及其与药物的功能之间的关联性不甚清楚,无法优化、控制其制备工艺,更无法建立科学、合理的质量标准。因此,本论文拟以五味子为研究对象,从五味子的“五味”入手,进行“五味”的物质基础研究,探明五味子“五味”的物质基础内涵,为探索各“味”物质基础的基本功能及其相互关系打下基础,并为科学、合理利用五味子提供科学依据,为同类研究提供示范。  本论文共分为六章。  第一章五味子“五味”基础物质群的制备  以北五味子Schisandra chinensis(Turcz.) Baill.为研究对象,从“五味”入手,采用系统的提取分离方法,制备得到了4个目标成分群,分别为“甘”味基础物质——多糖类成分群;“酸”味基础物质——有机酸类成分群;“苦”味基础物质——木脂素类成分群及“辛”味基础物质——挥发油。为深入阐释“五味”物质基础及其味能关系奠定了基础。  第二章五味子“五味”基础物质的对照品研究  通过系统的化学成分研究,从五味子中分离鉴定了11种化学成分,即五味子乙素(Schizandrin B,WWZ-1);五味子丙素(Schisandrin C,WWZ-2);五味子醇甲(Schisandrol A,WWZ-3);五味子醇乙(Schisandrol B,WWZ-4);戈米辛L1(Gomisin L1,WWZ-5);柠檬酸单甲酯(Monomethyl Citrate,WWZ-6);奎尼酸(Qunic acid,WWZ-7);五味子甲素(Schizandrin A,WWZ-8);五味子酯甲(Schisantherin,WWZ-9);柠檬酸(Lemon acid,WWZ-10);原儿茶酸(Protocatechuic acid,WWZ-11)。为深入分析五味子“五味”基础物质的成分组成及其含量提供了对照品。  第三章五味子“四味”基础物质的色谱分析  首次以2个检测波长对五味子的“酸味”、“苦味”基础物质进行了HPLC图谱分析和指认,结果显示“酸味”物质群以柠檬酸、奎尼酸为主,“苦味”物质群主要由五味子醇甲等、五味子醇乙、五味子酯甲、戈米辛、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素等木脂素类成分组成;以柱前衍生化HPLC法对“甘味”基础物质(五味子多糖成分)进行了分析,研究表明五味子多糖主要由甘露糖、半乳糖醛酸、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖等单糖构成;以GC-MS法对五味子“辛味”基础物质进行了分析。以上研究初步初步表征了五味子中“四味”物质群的化学成分组成,为深入揭示五味子中“五味”物质基础内涵提供了可靠线索。同时,通过对不同产地10批次五味子饮片的分析,建立了五味子饮片的对照指纹图谱,并以分离得到的化合物为对照,归属了五味子指纹图谱中的10个色谱峰,明确了五味子饮片的化学成分组成,为五味子饮片及其炮制品的定性鉴别提供了更为科学的方法。  第四章五味子“四味”基础物质的主要成分含量测定  首次建立了五味子中柠檬酸、奎尼酸等2种主要有机酸类成分的HPLC含量测定方法,“酸味”物质群中以柠檬酸含量最高、奎尼酸次之,2种成分总量达49.82%;“苦”味物质群中以五味子醇甲含量最高,达20%以上,7种木脂素类成分总量约为43%; UV法测定“甘”味物质群中粗多糖含量约为66%,并对甘露糖、半乳糖醛酸等5种单糖类成分进行了定量分析;以GC-MS法分析了“辛”味物质群总挥发油中72个色谱峰,鉴定了其中51个化合物,并根据峰面积计算出各化合物在总挥发油中的相对百分含量约为92%;以上研究基本探明了五味子中酸、苦、甘、辛等4味物质群的主要组成及各成分的量比关系。此外,本研究还对五味子饮片中7种木脂素类成分、3种有机酸类成分(柠檬酸、奎尼酸、原儿茶酸)、多糖等进行了10批次饮片的定量分析,突破了以往仅以木脂素类成分为标准评价五味子质量的模式,完善了五味子饮片的质量控制体系。  第五章总结  本研究首次以五味子为范例,从五味子的“五味”入手,初步制备了酸、苦、甘、辛等4味物质群,以色谱定性与定量分析方法相结合,进行了辛、甘、酸、苦等“四味”的物质基础研究,初步探明五味子“四味”物质基础的化学组成及其主要成分的量比关系,为深入揭示五味子“五味”的味效相关性提供了可靠线索,为科学、合理利用五味子提供科学依据。同时,以木脂素、有机酸、多糖等多类成分对五味子饮片的质量评价标准进行了研究,为建立多成分、科学合理的五味子饮片质量控制体系提供了可靠的现代科学依据。  第六章文献综述  查阅了近30年来有关五味子的国内外文献研究资料,从种质资源、化学成分、炮制研究及药理作用等4个方面对五味子研究现状进行了系统的整理和分析,为本课题研究方案的制订和顺利实施提供了有益的借鉴。
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