虫草多糖的分离纯化及其生理活性的研究

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冬虫夏草是我国传统名贵滋补中药材,具有显著的保健防病作用。但是天然虫草资源缺乏,市场上供不应求,因此冬虫夏草的人工发酵培养技术受到极大重视。而不同发酵工艺生产的菌丝体是否都具有与天然虫草相同的药理作用也成为这一领域研究的热点。本文以实验室研发的一种新型固态发酵工艺生产的冬虫夏草菌丝粉为实验材料,提取纯化出单一组分虫草多糖,初步探究该纯化组分的组成结构,并研究其免疫学活性、抗肿瘤活性以及抗氧化活性。主要结果如下:1.从冬虫夏草菌丝体中分离纯化出一种虫草多糖CSPS。纯度鉴定表明,CSPS为均一的多糖组分。凝胶过滤法测得CSPS的相对分子质量约为1.17×10。,样品中不含有硫酸基。傅里叶红外变换光谱仪分析表明CSPS具有多糖的特征吸收,并含有吡喃环特征吸收峰。GC分析表明CSPS由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,其组成比例为鼠李糖:木糖:甘露糖:葡萄糖:半乳糖=1:2.39:5.40:30.67:13.37。CSPS经高碘酸氧化分析表明CSPS糖链结构中含有1→2、1→3、1→4、1→6糖苷键。2.体外免疫学活性实验结果表明,CSPS在实验浓度范围内能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活力、促进腹腔巨噬细胞释放NO、显著促进小鼠脾和胸腺淋巴细胞增殖、增加脾淋巴细胞所产生的TNF-α的含量。CSPS具有增强免疫的作用。3.体外抗癌实验结果表明,CSPS能抑制小鼠S180肿瘤细胞的增殖,且在实验浓度范围内,呈现出明显的剂量依赖效应。采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪鉴定细胞凋亡也得出,CSPS的抑制率具有一定的剂量依赖效应的结论。表明提取出的虫草多糖CSPS具有抗癌活性。4.CSPS还原力测试结果表明,其具有一定的还原能力,且随着多糖浓度的提高,还原力呈上升趋势。羟自由基清除实验结果表明,CSPS具有一定的羟自由基清除能力,且随着多糖浓度的提高,清除率呈上升趋势。超氧自由基清除能力实验结果表明,CSPS具有一定的清除超氧自由基能力,且随着多糖浓度的提高,清除率呈上升趋势。
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