前言 先天性心脏病(Congenital Heart Disease,CHD)属于复杂性疾病,其易感基因尚未明确。它是由于心脏发育中相关基因异常所致的先天畸形,在活产儿中的发病率为0.8%～1%,严重危害婴幼儿的健康。发育遗传学的兴起及其丰富的成果为研究胚胎发育、器官形成提供了新思路。心脏形成是胚胎发育的早期事件,它涉及胚胎发育过程中不同时间、不同空间若干个基因的先后表达及精确的相互作用,也涉及细胞的迁移、分化和增殖。学者们通过动物模型的研究,发现了一些与心脏发育相关的基因,其中TBX5是近年发现的、在心脏发育过程中起重要作用的一个基因。 在人类和小鼠心脏发育和上肢形成过程中,TBX5基因表达受到精确调控,TBX5基因表达量过低或过高都将导致心脏畸形的发生。TBX5与另两个转录因子NKX2.5、GATA4之间存在着复杂的相互作用,在心脏发育中起主要作用,共同调控许多下游基因的表达。但其具体的作用机制及作用途径仍不清楚。受条件限制,直接研究人类胚胎是极其困难的,因此,国内外学者多将小鼠作为研究心脏发育相关基因的动物模型。但考虑到体积大小及早期胚胎心脏分离操作的难易,我们认为Wistar大鼠更适合作为研究心脏早期发育中Tbx5及相关基因间调控机制的实验动物。因迄今未见大鼠Tbx5基因的相关报道,所以,本研究中我们首次从大鼠孕13天胚胎心脏中克隆了Tbx5基因cDNA序列,并对其生物学特性,如组织表达谱、亚细胞定位及融合蛋白的表达做了相关研究。 Nkx2.5基因属于Homeobox基因家族,其表达是心脏前体细胞分化的最早期标志之一,对于果蝇、小鼠及人类心脏的正常发育是必需的。在心脏发育过程中,作为上游主基因,Nkx2.5调控许多下游基因的表达。研究证实,NKX2.5和TBX5的编码蛋白存在着相互作用,但此二个转录因子间仅仅是平行的相互作用,还是存在着上下游的调控关系仍不十分清楚。我们